淋巴增殖性疾病分子生物學(xué)與分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、目的： 慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)的臨床病程和轉(zhuǎn)歸呈高度異質(zhì)性，而免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgVH)基因突變是CLL最重要的獨(dú)立預(yù)后因素之一。依據(jù)IgVH基因是否發(fā)生體細(xì)胞突變將CLL劃分為兩種亞型：IgVH無突變型起源于生發(fā)中心前B細(xì)胞，病情進(jìn)展快，生存期短；IgVH突變型起源于生發(fā)中心后B細(xì)胞，病程進(jìn)展緩慢，生存期較長。CLL惡性B淋巴細(xì)胞的VH基因家族在不同種族人群的分布情況已經(jīng)陸續(xù)有報(bào)道，西方國家對(duì)于VH家族成員的表達(dá)及

2、突變頻率研究較多，亞洲地區(qū)只有日本及伊朗曾有相關(guān)報(bào)道，并且與西方國家資料相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究在國內(nèi)首次應(yīng)用多重PCR技術(shù)探討我國CLL患者IgVH基因家族表達(dá)率以及突變率，為患者預(yù)后的評(píng)價(jià)提供有力信息，并比較IgVH基因在東西方之間存在的差異. 方法： 應(yīng)用多重PCR技術(shù)擴(kuò)增64例CLL患者的IgVH基因，純化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物后直接測序，應(yīng)用IMGT/V-QUEST及IGBlast數(shù)據(jù)庫分析，明確IgVH基因片段有無

3、突變和突變位置，以及VH、DH、JH家族各個(gè)成員組成情況。 結(jié)果： 64例CLL患者中，VH3家族31例(48％)、VH4家族26例(41％)、VH1家族4例(6％)、VH2家族2例(3％)、VH7家族1例(2％).44例患者發(fā)生體細(xì)胞突變，占CLL患者的69％；20例無突變，占CLL患者的31％，其中6例(9％)VH基因的同源性為100％.VH4家族中有9例無突變(9/26，35％)；VH3家族中8例無突變(8/31，

4、26％)；VHI家族中1例無突變(1/4，25％)。在所檢測的CLL標(biāo)本中，VH4-34是最常見的VH基因片段，檢測出8例(13％)，其中無突變3例；其次為VH4-59，檢測出7例(11％)，無突變者3例。DH基因中DH3家族最常見，有25例(39％)；其中11例(11/20，55％)出現(xiàn)在無突變組中-無突變組中最常見的DH基因片段為DH3-10和DH3-22，各為4例(4/20，20％)。JH基因中JH6家族最常見，檢測出23例(36