微懸臂梁生化傳感技術(shù)在醫(yī)療檢測中的研究.pdf

1、在醫(yī)學(xué)研究中，抗原和抗體的檢測作為用于評價人和動物免疫功能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，對疾病的診斷有重要意義。傳統(tǒng)的檢測方法需要利用同位素、熒光或者酶等標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記，可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾；而常用的ELISA只能應(yīng)用到靜態(tài)標(biāo)定方法中，耗時較長。尋求無標(biāo)記、高靈敏度的新型傳感技術(shù)一直是人們研究的熱點(diǎn)。微懸臂梁生化傳感技術(shù)可以進(jìn)行實(shí)時檢測，無需標(biāo)記，并且容易實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高通量平行陣列測量。它的檢測原理是利用表面上了修飾探針分子的微懸臂梁去檢測樣品中

2、的靶分子，當(dāng)兩者發(fā)生具有特異性的生化反應(yīng)時，產(chǎn)生的微梁表面應(yīng)力改變導(dǎo)致梁發(fā)生彎曲變形，再通過光電位置敏感探測器檢測出梁的變形值，實(shí)現(xiàn)對樣品中的靶分子進(jìn)行檢測。微懸臂梁傳感技術(shù)為醫(yī)學(xué)研究上抗原抗體的檢測提供了一種高效直觀的識別方法，以它為基礎(chǔ)在抗原抗體檢測研究上將具有開拓性的意義。
　　 本文利用微懸臂梁生化傳感系統(tǒng)首次對對乙肝、青蒿素、馬兜鈴酸三種抗原抗體的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測，并討論抗原抗體在實(shí)驗(yàn)過程中的活性問題。同時分析了溶液

3、折射率的改變對光路系統(tǒng)的影響，進(jìn)而影響系統(tǒng)的檢測靈敏度，提出一種光路系統(tǒng)的改進(jìn)方案，較好的消除了折射率對靈敏度的影響。此外，還分析了樣品的流動速度對于微懸臂梁的干擾，并對液體的流動速度進(jìn)行了標(biāo)定。
　　 采用硫醇自組裝方法將乙肝表面抗原修飾到微懸臂梁表面上，并通過酶聯(lián)檢疫法(ELISA)檢驗(yàn)了乙肝表面抗原能否成功修飾，以及在長時間的修飾過程中活性是否喪失；并利用微梁生化傳感系統(tǒng)對乙肝表面抗原抗體的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明

4、：硫醇自組裝法能夠?qū)⒁腋伪砻婵乖晒π揎椀轿冶哿航鸨砻嫔?，在長達(dá)近30小時的實(shí)驗(yàn)中活性并未喪失，采用微懸臂梁生化傳感方法無法檢測到乙肝表面抗原抗體特異性結(jié)合響應(yīng)信號，檢測出的響應(yīng)值經(jīng)驗(yàn)證是由溶液的折射率改變或分子物理吸附所導(dǎo)致的。
　　 采用巰基化二抗的修飾方法，將青蒿素抗體和馬兜鈴酸抗體修飾到微懸臂梁金表面，對不同濃度的青蒿素抗原和馬兜鈴酸抗原進(jìn)行檢測，并利用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測了修飾到微懸臂梁金表面上的抗體活性。通過實(shí)驗(yàn)分析