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1、黃霉素屬于磷酸多糖類抗生素,其產(chǎn)生菌為灰綠色鏈霉菌,是一種新型的抗生素類藥物添加劑或促生長(zhǎng)劑。以其高效、低毒和低殘留在畜牧業(yè)上有著廣闊的應(yīng)用前景,是公認(rèn)的綠色飼料添加劑之一。黃霉素的生產(chǎn)過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單,所用原料大部分為農(nóng)副產(chǎn)品,少數(shù)是普通無(wú)機(jī)化工原料,容易得到,成本低。生產(chǎn)過(guò)程對(duì)環(huán)境污染小,是一個(gè)有利于國(guó)計(jì)民生的獸用藥。本研究主要是在穩(wěn)定生產(chǎn)的基礎(chǔ)上,對(duì)黃霉素菌種工藝和發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化。 ⑴運(yùn)用氯化鋰前處理與紫外線復(fù)合處理進(jìn)行誘變
2、,并結(jié)合自然分離,篩選得到比出發(fā)菌株產(chǎn)量提高50%的高產(chǎn)菌株,同時(shí)對(duì)菌種工藝進(jìn)行優(yōu)化,通過(guò)試驗(yàn)研究了斜面的培養(yǎng)周期和種子齡對(duì)發(fā)酵的影響。結(jié)果表明:孢子齡為72小時(shí),種子齡為37小時(shí)是合適的培養(yǎng)時(shí)間。 ⑵對(duì)發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化。根據(jù)黃霉素的代謝特點(diǎn)對(duì)原料進(jìn)行篩選??梢宰鳛樘荚吹挠杏衩椎矸邸⑵咸烟?、豆油、可溶性淀粉等,通過(guò)優(yōu)化正交試驗(yàn),最后選取4%的玉米淀粉作為發(fā)酵的主碳源,豆油作為輔助碳源,其發(fā)酵水平較高,成本低,來(lái)源廣,質(zhì)量穩(wěn)定,貯
3、存方便、使用方便。 ⑶氮源可選擇的范圍也很廣,通過(guò)試驗(yàn),選擇硫酸銨作為無(wú)機(jī)氮源,生物氮素和低溫黃豆餅粉為有機(jī)氮源同時(shí)使用,為產(chǎn)生菌提供豐富的培養(yǎng)成分,總的氮源比例達(dá)3.0%以上。在碳氮源優(yōu)化完成后,先后對(duì)微量元素和無(wú)機(jī)鹽等進(jìn)行了優(yōu)化,其中磷酸氫二鉀和硫酸鎂等對(duì)發(fā)酵的影響較大,最后確定了發(fā)酵的優(yōu)化配方為:磷酸氫二鉀0.02%,硫酸鎂0.05%,玉米淀粉4.0%,低溫黃豆餅粉2.0%,生物氮素1.0%,硫酸銨0.3%,硫酸鋅0.00
4、02%,豆油4.0%,CaCO30.5%,消泡劑0.01%,硫酸鈷0.00001%,表面活性劑0.7%,CuSO4·5H2O0.0005%,玉米漿0.9%,F(xiàn)eSO4·7H2O0.00004%。 ⑷對(duì)補(bǔ)料和補(bǔ)油等工藝控制進(jìn)行優(yōu)化。中間補(bǔ)料的批次,比不補(bǔ)料的發(fā)酵水平要高,菌種的產(chǎn)素時(shí)間延長(zhǎng)。因此,將補(bǔ)料納入正常工藝范圍。開始使用補(bǔ)水方法時(shí)完全是根據(jù)時(shí)間即定時(shí)補(bǔ)水,后根據(jù)黃霉素發(fā)酵的代謝曲線,改為根據(jù)溶氧的水平控制補(bǔ)水,再根據(jù)菌絲的
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