阿維菌素菌種的選育及發(fā)酵工藝優(yōu)化的研究.pdf

1、作為目前發(fā)現(xiàn)是為有效的殺蟲劑之一的阿維菌素,其生產(chǎn)水平的提高關(guān)鍵在于阿維菌素高產(chǎn)突變株的獲得以及發(fā)酵工藝的優(yōu)化.該實(shí)驗對阿維菌素的生產(chǎn)菌株采用了半理化的篩選方法:出發(fā)菌株R-V-22經(jīng)UV、NTG和MMS三輪的處理,同時分別以氮亮氨酸、氯乙酸鈉和2-去氧葡萄作為篩子,最后得到高產(chǎn)抗性突變株AV-4-56,其阿維菌素Bla的產(chǎn)量提高了60％左右.對高產(chǎn)菌株AV-4-56的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,結(jié)果表明:AV-4-56相對于出發(fā)菌株R-V-22

2、生長速度快,通氣量要求偏高,以剪切力的敏感度降低,可以耐受0.1％的KH<,2>PO<,4>.加入0.1％的磷酸鎂的捕銨劑和5.0ppm的Zn2+和40ppm的Co2+可以提高阿維菌素的產(chǎn)量.同時采用正交試驗法確定最佳碳氮源的比例,并且在發(fā)酵優(yōu)化條件上的基礎(chǔ)上,研究了種子的種齡和接種量的影響,最后,AV-4-56在搖瓶培養(yǎng)條件下比出發(fā)菌株R-V-22的阿維菌素產(chǎn)量提高了70％.考察了高產(chǎn)菌株AV-4-56和出發(fā)菌株R-V-22在2噸種了

3、罐和80噸發(fā)酵罐的代謝特性.結(jié)果表明:高產(chǎn)菌株AV-4-56比出發(fā)菌株R-V-22的代謝來得快,它在發(fā)酵培養(yǎng)48hr左右pH就下降到6.0附近,氨基氮消耗到整個發(fā)酵周期的最低水平,而菌絲濃度增加到最高水平,其生長轉(zhuǎn)為產(chǎn)素期.但消沫劑用量和動力需求量都比出發(fā)菌株R-V-22要高10％以上.高產(chǎn)菌株AV-4-56比出發(fā)菌株的每天糖耗速率要高1.0％左右,因而其在80噸發(fā)酵罐的10天發(fā)酵周期內(nèi),阿維菌素Bla的產(chǎn)量可以達(dá)到2500ug/ml以