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文檔簡介
1、本研究將透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)轉(zhuǎn)入結(jié)冷膠生產(chǎn)菌株少動鞘氨醇單胞菌Sphingomonas elodea JLJ中，使得菌株在低氧條件下的生長能力提高，最終結(jié)冷膠產(chǎn)膠率顯著提高。
首先，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征和16S rDNA序列的分析，確定菌株JLJ應(yīng)為鞘氨醇單胞菌屬少動鞘氨醇單胞菌。其次，從透明顫菌中克隆獲得帶有啟動子序列的血紅蛋白基因，將其轉(zhuǎn)入菌株JLJ中獲得轉(zhuǎn)化子JLJ-VHb+，PCR鑒定、SDS-PAG
2、E分析及CO差光譜分析結(jié)果表明血紅蛋白基因在菌株JLJ中成功表達(dá)，且具有生物活性。最后，對改造菌株JLJ-VHb+的發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。確定培養(yǎng)基配方為:蔗糖3％，黃豆餅粉0.5％, NaNO30.1％，KH2PO40.1％，K2HPO40.15％，MgSO40.06％，自來水配制。確定最適搖瓶發(fā)酵條件為:培養(yǎng)基初始pH值6.0，種齡16h，接種量10％，培養(yǎng)溫度30℃，轉(zhuǎn)速200r/min，發(fā)酵72h。在經(jīng)過分子生物學(xué)
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