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1、結(jié)冷膠作為近年來(lái)最有發(fā)展前景的微生物食用膠,具有用量低、熱穩(wěn)定性好、耐酸性和優(yōu)越的呈味性、彈性和硬度可調(diào)性及良好的配伍性等優(yōu)點(diǎn)。作為懸浮劑、穩(wěn)定劑、增稠劑、乳化劑、成膜劑和潤(rùn)滑劑等,廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、化工等多個(gè)領(lǐng)域。目前,結(jié)冷膠工業(yè)化生產(chǎn)產(chǎn)量較低、消耗能源及生產(chǎn)成本較高。利用現(xiàn)代生物技術(shù)的方法來(lái)提高結(jié)冷膠產(chǎn)率與質(zhì)量,將是未來(lái)結(jié)冷膠生產(chǎn)與研究的發(fā)展方向。
本論文是以少動(dòng)鞘酯單胞菌為研究材料,通過(guò)搖瓶發(fā)酵,優(yōu)化其發(fā)酵參數(shù)
2、,以獲得高產(chǎn)量低成本的發(fā)酵工藝。為降低溶氧對(duì)結(jié)冷膠發(fā)酵的影響,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在發(fā)酵期間補(bǔ)加碳源、添加攜氧劑以降低初始碳源對(duì)菌種的抑制、降低由氧傳遞對(duì)產(chǎn)量的影響,最終達(dá)到提高產(chǎn)量的目的。主要研究?jī)?nèi)容如下:
實(shí)驗(yàn)以發(fā)酵液的粘度以及粗膠產(chǎn)率為指標(biāo),測(cè)定了菌體在種子瓶及發(fā)酵瓶中的生長(zhǎng)曲線,并對(duì)發(fā)酵條件如種齡、初始pH值、培養(yǎng)溫度、揺瓶轉(zhuǎn)速、裝液量以及接種量等參數(shù)進(jìn)行單因素優(yōu)化;通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),最終確定了最適發(fā)酵培養(yǎng)條件:種齡為18
3、h;裝液量為10%;溫度為28℃;初始pH為7.0;搖瓶轉(zhuǎn)速為220 rpm;接種量為10%。
實(shí)驗(yàn)研究了三種常用攜氧劑(H2O2、正十二烷、Triton X-100)的添加情況,對(duì)添加種類、添加時(shí)間、添加量進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),并通過(guò)組合添加,篩選出最適攜氧劑及添加條件。其中最適攜氧劑為H2O2,最適添加時(shí)間為40~44 h,最適添加量為20 μL/25 mL,產(chǎn)率較對(duì)照組提高了103.37%。最適添加組合為正十二烷和H2O2
4、,其產(chǎn)率較對(duì)照組提高了124.54%。通過(guò)二步補(bǔ)碳法,確定最佳碳源組合為:初始碳源2%的葡萄糖,補(bǔ)加碳源4%的麥芽糖,最佳補(bǔ)碳時(shí)間為18 h。
實(shí)驗(yàn)以結(jié)冷膠產(chǎn)率和發(fā)酵液粘度為指標(biāo),對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源、氮源種類和用量,硫酸鎂、磷酸二氫鉀的用量等進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),初步確定了較合適的種類和用量。并采用響應(yīng)面分析法對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化,確定培養(yǎng)基最佳工藝配方為:麥芽糖53.2 g/L、蛋白胨3.5 g/L、硫酸鎂3.2 g/L、磷酸二氫鉀8
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