結(jié)冷膠發(fā)酵條件的優(yōu)化及多種提取產(chǎn)品的研究.pdf

1、結(jié)冷膠是近年來最有發(fā)展前景的微生物多糖之一,廣泛的應(yīng)用于食品、藥品、石油、化工等多個(gè)領(lǐng)域,本文主要研究了以下幾個(gè)方面:
　　(1)以實(shí)驗(yàn)室原有菌株為出發(fā)菌株,進(jìn)行了紫外線(UV)、亞硝基胍(NTG)誘變處理,得到一株產(chǎn)膠率高并且性能穩(wěn)定的菌株P(guān)-8,使結(jié)冷膠的產(chǎn)膠得率由3.9g/L提高到14.2g/L,提高了2.64倍。并且,該菌株碳源利用較廣,能很好的利用有機(jī)氮源,最適生長(zhǎng)溫度為28℃-30℃,最適生長(zhǎng)初始pH為6.5～7.0,

2、用磷酸鹽緩沖液可保藏半年時(shí)間。
　　(2)通過單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)對(duì)P-8菌發(fā)酵產(chǎn)結(jié)冷膠的培養(yǎng)基成分和最適發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定了菌株P(guān)-8的最佳的發(fā)酵條件。最佳培養(yǎng)基組分為:蔗糖為42.9g/L,豆粉堿解液6.9g/L,磷酸氫二鉀1.8g/L,磷酸二氫鉀1g/L,硫酸鎂1g/L,硫酸錳0.02g/L,硫酸亞鐵0.01g/L。最佳發(fā)酵條件為:500ml三角瓶裝液量80ml,搖床轉(zhuǎn)速200rpm,培養(yǎng)溫度為28℃,發(fā)酵周期為72

3、h,種子液的最佳培養(yǎng)時(shí)間為24h,最佳接種量5％。條件優(yōu)化后結(jié)冷膠的得率由原來的16.2g/L提高到26.0g/L,提高了60.5％。
　　(3)50L全自動(dòng)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)表明,普通的攪拌形式無(wú)法滿足其發(fā)酵過程中高需氧需求,最終殘?zhí)菫?.02g/L,發(fā)酵液粘度5300cp,結(jié)冷膠得率為17.9g/L,1噸機(jī)械攪拌罐實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在改變攪拌形式,加大攪拌力度的條件下,最終得率達(dá)到搖床水平,維持在26.2g/L左右,黏度達(dá)到9800cp,

4、殘?zhí)墙档?.02g/L左右。
　　(4)隨著離子濃度的增加,凝膠溫度先升高后降低,凝膠強(qiáng)度先增大后減小,在離子含量很少或很多時(shí),結(jié)冷膠的凝膠溫度和強(qiáng)度都很低。凝膠強(qiáng)度和溫度隨著結(jié)冷膠濃度的增加而增加。鈣離子和鉀、鈉離子在促進(jìn)結(jié)冷膠凝膠上無(wú)協(xié)同作用。
　　(5)結(jié)冷膠后提取的初步條件:將發(fā)酵液稀釋10倍,9000rpm離心15min,結(jié)冷膠菌體大量沉淀,離心后的上清液,堿性蛋白酶酶解蛋白質(zhì)的效果最好,蛋白質(zhì)去除率可達(dá)93.56