土壤自生固氮菌的分離鑒定及生物固氮與促進(jìn)植物生長(zhǎng)效應(yīng)研究.pdf

1、自生固氮菌是植物根際促生細(xì)菌(PGPR)的重要組成成分,并且可以將大氣中的N2通過生物固氮作用供給植物生長(zhǎng),提高植物對(duì)氮素的利用。本試驗(yàn)從自生固氮菌的分離、篩選入手,從Ashbv無氮培養(yǎng)基上分離得到26株形態(tài)不一的自生固氮菌,通過連續(xù)傳代,篩選出14株長(zhǎng)勢(shì)良好的菌株。進(jìn)一步通過在Ashby無氮液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)12d,測(cè)定其固定的總氮量以衡量其固氮能力,結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株R6,MR4,MR8,V1固定的氮量相對(duì)較高,分別達(dá)到了2.7,4.0,3

2、.0,2.7 mg L-1。通過小麥盆栽試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)接種R6,MR4,MR8,V1都能提高小麥生物量和全氮量。選擇效果顯著的菌株R6,MR4作為下一步試驗(yàn)的研究材料。通過染色、鏡檢、生理生化試驗(yàn),以及16S rDNA技術(shù)鑒定并命名篩選的菌株R6為紅色紅球菌(Rhodococcus rubber R6),MR4為蕓苔葉桿菌(Phyllobacterium brasssicacearum MR4)。 為了進(jìn)一步確定紅色紅球菌和蕓苔葉桿

3、菌的植物生長(zhǎng)促進(jìn)作用,分別在實(shí)驗(yàn)室和溫室進(jìn)行了試驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)室利用在LB和Ashby中生長(zhǎng)的蕓苔葉桿菌和紅色紅球菌接種黃瓜幼苗,結(jié)果表明,兩種細(xì)菌都能促進(jìn)黃瓜根系生長(zhǎng),增加黃瓜總根長(zhǎng),提高黃瓜植株生物量。在溫室進(jìn)行的番茄盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,接種蕓苔葉桿菌和紅色紅球菌都能顯著提高番茄植株的生物量和總氮吸收量,并且番茄生物量和氮吸收量隨篩選菌株的接種劑量的增加而提高,表明這兩株菌屬于PGPR菌株。對(duì)番茄盆栽試驗(yàn)的土壤樣品進(jìn)行土壤DGGE分析,發(fā)