重組HDL-抗乙肝病毒藥物復合物的制備及其肝靶向作用的研究.pdf

1、該研究分別采用了DS.50-MnCl<,2>法從人血漿提取獲得opoA-I,冷丙酮-MnCl<,2>法從FIV提取獲得apoA-I,冷丙酮-等電點法從基因工程畢赤酵母菌表達物提取獲得基因工程apoA-I.這些apoA-I經(jīng)Dot blotting和<'125>I放射法測定均具有與SMMC-7721肝細胞、HepG<,2>2.2.15肝細胞和大鼠肝臟細胞結(jié)合的生物活性.同時對阿昔洛韋進行了前藥設計合成,利用阿昔洛韋和棕櫚酰氯合成阿昔洛韋的

2、前體藥物阿昔洛韋棕櫚酸酯,收率達68.0﹪.并通過紫外可見掃描光譜、紅外吸收光譜、質(zhì)譜及<'1>H核磁共振譜、<'13>C核磁共振譜、重水交換譜、BB-DEPT譜、<'1>H-<'1>H COSY譜、<'1>H-<'1>H譜、HSQC譜及HMBC譜等確證該化合物為設計前藥.應用脫氧膽酸鈉法和超聲法可制備重組HDL-那西肽復合物和重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復合物;其中脫氧膽酸鈉法可將復合物粒徑調(diào)控到約20nm.采用HepG<,2>2.2

3、.15肝細胞模型進行抗乙肝病毒試驗.結(jié)果顯示人源apoA-I與基因工程apoA-I的重組HDL-那西肽復合物對HBsAg和HBeAg抑制率相當.以HBsAg抑制率50﹪為指標,二者的抗病毒能力都是那西肽脂質(zhì)體的4倍,是游離那西肽的20倍.重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復合物的抗乙肝病毒試驗結(jié)果顯示:人源apoA-I與基因工程apoA-I的重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復合物對HBsAg和HBeAg抑制率也相當;以HBsAg抑制率20﹪為指標

4、,二者的抗病毒能力都是阿昔洛韋棕櫚酸酯脂質(zhì)體的20倍,是游離阿昔洛韋棕櫚酸酯的20倍,是阿昔洛韋脂質(zhì)體的40倍,是游離阿昔洛韋的200倍.大鼠體內(nèi)靶向試驗顯示,相比游離藥物在肝臟的含量17.5﹪和血漿的含量53.3﹪,人源apoA-I與基因工程apoA-I藥物復合物在肝臟的含量分別達到76.9﹪和71.2﹪,而血漿含量只有8.8﹪和10.2﹪.由此可見,人源apoA-I和基因工程apoA-I的重組HDL-抗乙肝病毒藥物復合物都具有肝靶向