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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文新型生物農(nóng)藥氨苷霉素的分離工藝及其結(jié)構(gòu)鑒定姓名:陳秀奇申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:徐志南岑沛霖2003.3.1燮娑鯊查⑧塑塑ABSTACTMildiomycinOVIIL)isanewkindofnucleosideagroantibioticwhichshoweds訂ongactivityagainstpowderymildewsandisremarkablylowtoxicityinmankinda
2、ndanimals,SOitwasahighpromisingproductTheobjectiveofthethesisistOestablishacomprehensiveprocesstoextractMILfromfermentationbrothbyionexchangeandpreparethepureMILThechemicalstructureofMILwillbeidentifiedalSOAtfiest,theana
3、lyticmethodsforMILwereestablishedBothSakagnchiReactionmethodandHPLCmethodforquantitativeanalysisofMILwererespectivelyestablishedSakaguchiReactionmethodwasfastandsimple,butWaseasilyinterferedbymetalionsandarginineItWasonl
4、ysuitablefortheanalysisofrelativepureMILHPLCmethodWasfast,accurateandseldominterfered,whichwasverysuitableforquantitativeanalysisofMILinfermentationbrothandduringextractingprocessThechromatographicconditionswereasfollowi
5、ngsColumn:AgilentZorbaxSBC18(46x250mm,5岬);mobilephase:5%methanol0005Mcitratebuffer(pH58);detectwavelength:254nm;flowrate:O7mL/min;injectionvolume:15uL;columntemperature:roomtemperatureAseparationandpurificationprocessofM
6、ILfromfermentationbrothWasdevelopedTheprocessincludedfoursteps:1)Solidliquidseparation:thefermentationbrothwasregulatedbyaddingoxalicacidtOpH30Afterbeingkeptfor30min,itWascentrifugedorfiltratedThesupematantcontainingMILW
7、asobtainedforfurtherseparationInthisstep,therecoveryofMILWasalmost100%2)IonexchangeseparationARerthepHvalueofthesupernatantWasadjustedtopH75,itpassedthroughanionexchangecolumnfilledwitllmacroreticularcationion—exchangere
8、sin,D115,ataflowrateof1BV/hTheMILWasadsorbedontheresinThenthecolumnWaselutedwim2%ann/loniaataflowrateof05BV/htodesorbMILExperimentaldatashowedthattheaverageadsorptioncapacityofD115resinforMILWas40~50mg/gdryresinandtheave
9、ragerecoveryinionexchangestepWasabout80%3)DecolorTheelutionfromionexchangecolumnwasadjustedtOpH65:thenpassedthroughacolumncontainingD750resinataflowrateofO5BV/hfordecolorizationTheexperimentalresultsindicatedthattheavera
10、gerecoveryofMILwasabout90%andthetreatmentcapacityofD750Was150mLelute/10mLwetresin4)PrecipitationanddryingAfterdecolorization,theelutionWasconcentratedandprecipitated、“tllethanoltoyieldcrudemildiomycinThecrudeMILWasfreezi
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