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文檔簡介
1、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是一種體外特定核酸序列擴增技術(shù),是分子生物學的重要實驗方法之一?,F(xiàn)已廣泛用于生命科學、遺傳學和醫(yī)學等領(lǐng)域等許多領(lǐng)域。DNA分子可以引入功能性基團連接在納米粒子表面上,同時本身可通過PCR進行大規(guī)模增殖。如果在納米粒子界面上能夠順利進行PCR并且應(yīng)用于納米材料的組裝,在功能材料學,生物學等方面均具有重要意義。本文系統(tǒng)研究了納米粒子界面上的聚合酶鏈反應(yīng)及其納米粒子聚集體的制備,并取得了以下幾個有意義的結(jié)果: 1
2、.研究了基于納米粒子界面上的PCR制備納米粒子聚集體。將引物連接在不同的納米粒子界面上,以質(zhì)粒pBluescript SK為模板,在納米粒子界面上進行PCR。利用原子力顯微鏡(AFM)和熒光光譜儀對PCR產(chǎn)物分別檢測。研究了PCR循環(huán)次數(shù)、納米粒子大小、擴增DNA片斷長短對制備納米粒子聚集體的影響。實驗結(jié)果表明:通過納米粒子界面上的PCR能夠制得以DNA為模板的納米粒子聚集體??刂芇CR循環(huán)次數(shù)、納米粒子大小、擴增DNA片斷長短可以制備
3、不同形狀和大小的納米粒子聚集體,而且這種聚集體在高溫時能分散,低溫時能復合。因此引物連接在納米粒子表面PCR,可制得具有可逆分散和聚集功能的納米粒子聚集體。 2.研究了啞鈴狀納米粒子聚集體的制備。首先制備粒度均一、分散性良好、不同粒徑的球形金納米粒子,通過Au-S鍵將5’端修飾-SH-(CH2)6-的引物連接在金納米粒子的界面上,進行PCR。利用AFM對制得的納米粒子聚集體進行檢測,研究了控制納米粒子聚集體形成啞鈴狀的制備條件。
4、實驗結(jié)果表明在優(yōu)化PCR的條件下,將兩種引物分別連接在金納米粒子表面,均能順利進行PCR并制得了以DNA為模板啞鈴狀納米粒子聚集體。通過控制PCR循環(huán)次數(shù),納米粒子大小及DNA擴增片斷的長短,能夠有效地控制納米粒子聚集體的大小。 3.研究了基于樹枝狀化合物(PAMAM)界面上的PCR及聚集體的制備。將引物通過靜電作用連接到PAMAM分子的表面,采用質(zhì)粒pBluescript SK作為模板,進行PCR。并用瓊脂糖凝膠電泳和透射電子
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