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1、本試驗(yàn)旨在研究益生菌對(duì)乳仔豬生長(zhǎng)性能和健康的影響,主要分兩部分進(jìn)行。首先,通過(guò)乳酪桿菌和糞腸球菌對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌試驗(yàn),獲得兩種益生菌的最佳配比。其次,通過(guò)對(duì)乳仔豬灌服復(fù)合益生菌,觀察其對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能和胃腸道微生物區(qū)系等方面的影響。試驗(yàn)選擇品種相同、出生日期相近、體重相近的初生仔豬15窩,每窩選擇8頭仔豬(公母各半),分為4個(gè)處理組,每窩每組兩頭仔豬,這樣每個(gè)處理組有15個(gè)重復(fù)共30頭仔豬。試驗(yàn)分組如下:對(duì)照組,灌服生理鹽
2、水;試驗(yàn)Ⅰ組,灌服乳酪桿菌培養(yǎng)液;試驗(yàn)Ⅱ組,灌服糞腸球菌培養(yǎng)液;試驗(yàn)Ⅲ組,灌服乳酪桿菌和糞腸球菌混合培養(yǎng)液。仔豬初生時(shí)灌服1 mL,之后在7、14和21d時(shí)分別灌服2 mL、3 mL和4 mL,共四次。試驗(yàn)結(jié)果如下:
(1)復(fù)合益生菌最適配比的確定:用MRS培養(yǎng)基分別培養(yǎng)乳酪桿菌和糞腸球菌,調(diào)整活菌數(shù)為1×108 CFU/mL,以1%接種量,進(jìn)行兩種益生菌標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)曲線的繪制。通過(guò)在不同時(shí)間測(cè)定OD值,pH值和活菌數(shù),繪制兩種菌
3、的生長(zhǎng)曲線。結(jié)果表明,乳酪桿菌和糞腸球菌的最佳培養(yǎng)時(shí)間分別為36 h和24 h。采用乳酪桿菌和糞腸球菌按不同比例混合,進(jìn)行對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),相對(duì)于單一菌來(lái)說(shuō),兩種菌混合使用具有更好的抑菌效果,其中當(dāng)乳酪桿菌和糞腸球菌比例為3:1時(shí),抑菌圈直徑最大(P<0.05),說(shuō)明該配比抑菌作用最強(qiáng)。
(2)益生菌對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響:試驗(yàn)結(jié)果表明,灌服益生菌組仔豬的平均日增重顯著高于對(duì)照組(P<0.05),以
4、兩種益生菌組合組仔豬平均日增重最高,但是與試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組相比差異不顯著(P>0.05);同時(shí)益生菌組仔豬的腹瀉率和死亡率與對(duì)照組相比顯著降低(P<0.05),三組益生菌組之間差異不顯著(P>0.05)。
?。?)益生菌對(duì)仔豬消化道酶活和血液生化指標(biāo)的影響:灌服復(fù)合益生菌組仔豬的胃、十二指腸和結(jié)腸中蛋白酶活性與對(duì)照組相比顯著提高(P<0.05);同時(shí)灌服復(fù)合益生菌組仔豬28 d糞便中蛋白酶活力顯著地高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組(P<0
5、.05),而21 d各組糞樣中的蛋白酶活差異不顯著。復(fù)合益生菌組仔豬十二指腸和盲腸淀粉酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而胃和結(jié)腸中淀粉酶活性差異不顯著(P>0.05);21 d和28 d糞樣中淀粉酶活各組之間均差異不顯著(P>0.05)。說(shuō)明益生菌可提高仔豬消化道中蛋白酶和淀粉酶的活性。三個(gè)益生菌組21 d仔豬血清IgA的含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而試驗(yàn)Ⅱ組IgG的含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅲ組(P<0.05);試驗(yàn)Ⅲ組血
6、清ALT和AST的含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05);ALP和BUN的含量各組之間沒(méi)有顯著差異;試驗(yàn)Ⅲ組GGT含量與對(duì)照組相比差異不顯著,與試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組相比差異顯著(P<0.05)。
?。?)益生菌對(duì)仔豬胃腸道內(nèi)容物pH值、乳酸菌和大腸桿菌數(shù)量的影響:灌服復(fù)合益生菌組仔豬的胃和十二指腸內(nèi)容物pH顯著低于對(duì)照組(P<0.05),空腸、盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物的pH值與對(duì)照相比沒(méi)有顯著差異(P>0.05),但均低于對(duì)照組。除直腸外,消化道各
7、段內(nèi)容物及糞便中乳酸菌和大腸桿菌的數(shù)量在各個(gè)處理組間均差異不顯著(P>0.05),但三個(gè)益生菌組胃腸道中大腸桿菌數(shù)量均低于對(duì)照組(P>0.05)。
?。?)益生菌對(duì)仔豬腸道黏膜免疫作用和微生物區(qū)系的影響:灌服復(fù)合益生菌組仔豬的小腸絨毛長(zhǎng)度顯著高于對(duì)照組(P<0.05);復(fù)合益生菌可顯著降低仔豬腸膜上促炎因子TNF-α的表達(dá)量(P<0.05),而提高抗炎因子TGF-β的表達(dá)量(P<0.05),從而提高機(jī)體的免疫力。整體來(lái)看,復(fù)合益
8、生菌組仔豬21 d胃、小腸和盲腸微生物相似性系數(shù)高于對(duì)照組,結(jié)腸和直腸微生物相似性系數(shù)則低于對(duì)照組;不同日齡仔豬糞樣的微生物相似性系數(shù)差異較大,但是益生菌組不同日齡之間糞樣中微生物相似性系數(shù)均高于對(duì)照組,說(shuō)明益生菌能使仔豬胃腸道微生物區(qū)系趨向穩(wěn)定。
綜上所述,益生菌通過(guò)調(diào)節(jié)乳仔豬胃腸道微生物區(qū)系,提高有益菌數(shù)量并降低大腸桿菌的數(shù)量,提高腸黏膜的免疫功能及消化道蛋白酶和淀粉酶的活性,降低仔豬腹瀉率和死亡率,最終達(dá)到提高仔豬生長(zhǎng)性
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