胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究外用胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合的影響，初步探討胸腺素β4在大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合中的作用機制，為應用胸腺素β4治療燒傷創(chuàng)面提供實驗依據(jù)。
　　方法：第一部分不同濃度胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合的影響
　　選擇240-260g SD大鼠128只，雌雄不限，按隨機數(shù)字表分成四組，分別為對照組、低濃度組(60mg/L)、中濃度組(120mg/L)及高濃度組(240mg/L)，每組32只，將大鼠用10％水合氯

2、醛按400mg／Kg劑量腹腔麻醉后，取直徑為3cm試管，盛裝91℃的熱水燙其背部8秒鐘［1-3］，制作一個直徑3.0cm圓形深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面，燙傷后對照組滴加0.9%生理鹽水0.1ml，低、中、高濃度組分別滴加60mg／L、120mg／L和240mg／L的胸腺素β4各0.1ml，每日一次。創(chuàng)面均采用無菌紗布包扎和透氣薄膜固定，隔日換藥一次。燙傷第7天、14天和21天測量創(chuàng)面面積以計算創(chuàng)面愈合率；切取創(chuàng)面組織塊 HE染色后進行組織學觀察；堿

3、水解法測定羥脯氨酸含量變化以及免疫組織化學法檢測 CD34表達，觀測CD34陽性血管密度，同時記錄各組愈合時間。數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包進行方差分析，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。
　　第二部分胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面bFGF和VEGF表達的影響
　　另選240-260g SD大鼠32只,雌雄不限，選用直徑為2.5cm的試管按第一部分造模方法在每只大鼠背部左右兩側各制作一處深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面，采用自身對照法設計右

4、側創(chuàng)面為實驗組，左側創(chuàng)面為對照組。實驗組創(chuàng)面滴加120mg/L胸腺素β4（通過第一部分實驗結果得知最佳濃度為120mg/L），對照組滴加0.9%生理鹽水，創(chuàng)面均采用無菌紗布包扎。燙傷后第1天創(chuàng)面開始用藥，每個創(chuàng)面每次劑量為0.1ml，每日一次，兩組均隔日同時換藥。分別在燙傷第7天、14天和21天計算創(chuàng)面愈合率，在燙傷后第3天、7天、14天和21天,每組各處死5只大鼠，取創(chuàng)面中心組織HE染色后觀察組織形態(tài)學變化；免疫組織化學法檢測堿性成纖

5、維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)及血管內皮細胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表達情況，Image Pro Plus軟件測量它們光密度(Integral Optial Desity,IOD)值。同時觀測創(chuàng)面愈合情況。實驗數(shù)據(jù)采用spss18.0軟件包進行配對t檢驗分析，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。
　　結果第一部分

6、不同濃度胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合的影響
　　1．創(chuàng)面愈合率：不同濃度胸腺素β4實驗組在每個時間點創(chuàng)面愈合率均高于對照組，其中以中濃度（120mg/L）組最為明顯,組間差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。2.愈合時間：胸腺素β4各組均少于對照組,其中以中濃度組最為明顯,具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。3.組織學觀察：不同濃度胸腺素β4實驗組組織毛細血管、成纖維細胞和膠原纖維均較對照組多，炎性細胞較對照組少,上皮化速度較對照組快，

7、其中以中濃度組最明顯。4.羥脯氨酸（HydroxyProhne，HYP)含量測定：在燙傷第7天、14天和21天實驗各組組織中HYP含量均高于對照組，其中以中濃度組(120mg/L)最明顯，其差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。5.CD34陽性血管密度值：實驗各組CD34陽性血管密度值在燙傷后迅速升高,燙傷后7天達到高峰,以后逐漸下降,其中以中濃度組變化較為顯著，對照組在燙傷后7天稍有上升，其余各個時間段變化不明顯,中濃度組在燙傷第7天及14

8、天均高于其他各組，且與低濃度組、高濃度組及生理鹽水組對比，差異均具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。
　　第二部分胸腺素β4對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面中bFGF和VEGF表達的影響
　　1.創(chuàng)面愈合率:燙傷第7天實驗組與對照組創(chuàng)面愈合率差異不大，無統(tǒng)計學意義，燙傷第14天和第21天實驗組高于對照組，其差異有顯著性，P＜0.05。2.愈合時間：實驗組愈合時間為22.46±0.89天，對照組為24.54±1.10天，兩組愈合時間差異有顯著性

9、，P＜0.05。3. bFGF光密度值：在燙傷第7天和第14天實驗組bFGF光密度值高于對照組，P＜0.05,有統(tǒng)計學意義。燙傷第3天及第21天與對照組差異不大。4. VEGF光密度值：燙傷第3天，兩組光密度值均有升高，兩組差異無統(tǒng)計學意義。燙傷第7天和第14天實驗組光密度度值高于對照組，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。燙傷21天，實驗組VEGF光密度值下降，與對照組差異不明顯。
　　結論：胸腺素β4可明顯促進大鼠深Ⅱ度