犬三種白內(nèi)障模型的建立和氧化損傷性白內(nèi)障發(fā)展進程中AQPO表達的研究.pdf

1、目的:通過探究犬三種白內(nèi)障模型的建立并比較三種模型的優(yōu)缺點，選擇一種白內(nèi)障模型作為續(xù)試驗，并檢測該模型白內(nèi)障發(fā)展進程與AQP0表達之間的關(guān)系，探索AQP0對白內(nèi)障形成的影響。
　　方法:(1)將60只平均年齡6月左右本地雜交犬，隨機分為6組，分別為氧化損傷性(Fenton)白內(nèi)障模型組、糖尿病性(STZ)白內(nèi)障模型組、硒性（亞硒酸鈉）白內(nèi)障模型組和各模型對照組，每組10只。每日用裂隙燈觀察并拍照，根據(jù)LOCSⅢ分級標準記錄晶狀體的

2、結(jié)構(gòu)變化并分級。(2)選取40只本地雜交犬隨機分為2組，分模型組和對照組，每組20只，根據(jù)LOCSⅢ分級標準對白內(nèi)障的形成過程進行分級，并在模型組每級形成的時間節(jié)點上使用RT-PCR方法檢測晶狀體中AQP0的表達量。
　　結(jié)果:(1)硒性白內(nèi)障模型，糖尿病性白內(nèi)障模型和氧化損傷性白內(nèi)障模型分級形成時間分別為C1(d):1±0.32、30±2.0和7±0.8。C2(d)分別為5±0.36、60±2.5和10±0.68。C3(d)分別

3、為11±0.48、150±6.25和15±1.0。C4(d)分別為0、180±6.5和24±1.54。C5(d)分別為0、240±12和48±1.52。硒性白內(nèi)障造模時間最短，但毒性過大，死亡率高達100％，氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性白內(nèi)障成模時間短。(2)硒性白內(nèi)障C1形成時的犬只數(shù)量為10只，糖尿病性白內(nèi)障為7只，氧化損傷性白內(nèi)障模型為10只。C2形成時的犬只數(shù)量依次為10只、4只和10只。C3形成時依次為10只、3只和10只。C4

4、形成時依次為0只、3只和10只。C5形成時依次為0只、3只和10只。三種白內(nèi)障模型對照組均為0只。氧化性白內(nèi)障模型的成模穩(wěn)定性較糖尿病性和硒性好。(3)三種造模方式均具可操縱性，而氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性和硒性略難。(4)三種白內(nèi)障模型裂隙燈的觀察:硒性白內(nèi)障在注射亞硒酸鈉生理鹽水后1d后出現(xiàn)試驗犬雙眼皮質(zhì)較多點狀混濁，5d后點狀混濁加深相連成散瞳后可見皮質(zhì)及周圍橢圓形陰影，大量空泡，11d后陰影面積擴大形成片狀，空泡量增多，陰影區(qū)眼

5、底細節(jié)不清晰。糖尿病性白內(nèi)障注射STZ后30d出現(xiàn)晶狀體少量的小囊泡，60d后小囊泡增多成群，150d后小囊泡連成片狀陰影，并由四周向赤道部伸展，陰影部眼底細節(jié)不清晰，180d后皮狀陰影加深，范圍擴大，陰影眼底細節(jié)不可見，240d后晶狀體皮質(zhì)及核質(zhì)完全呈灰白色混濁。氧化性白內(nèi)障注射Fenton后第7d形成晶狀體皮質(zhì)點狀分布的小白點陰影但可觀察眼底，注射后第10d晶狀體皮質(zhì)點狀分布的小白點漸漸加深變大形成扇形分布的白色陰影，注射后第15d

6、晶狀體皮質(zhì)扇形分布的白色陰影加深，范圍繼續(xù)擴大形成片狀，注射后24d片狀白色陰影擴展至晶狀體整個皮質(zhì)，注射后第48d侵蝕形成成熟的皮質(zhì)性白內(nèi)障。(5)氧化損傷性白內(nèi)障模型發(fā)展進程中AQP0表達量變化的數(shù)據(jù)處理采用相對定量的△△Ct法，根據(jù)各個基因的標準曲線，通過測試樣的CT值得到相對應(yīng)的數(shù)據(jù)，以此比較Fenton注射的氧化性白內(nèi)障形成后的7d、10d，15d、24d、30d、40d、48d的AQP0表達量變化。AQP0表達量在第7d為1