HIF-1α、VEGF在DN發(fā)病中的作用及冬蟲夏草對其干預(yù)的影響.pdf

1、目的：觀察STZ誘導(dǎo)的糖尿病腎病(DN)模型大鼠腎組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達狀況及冬蟲夏草(CS)對其的干預(yù)作用，探討DN的確切發(fā)病機制及冬蟲夏草改善糖尿病腎病慢性腎缺氧損傷的作用機制。
　　 材料與方法：對60只Wistar大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(60mg/kg)，72小時后測血糖，隨機血糖＞16.7mmol/L者誘導(dǎo)成1型糖尿病(DM)模型，DM模型成功45只大鼠，四周后留二十四

2、小時尿蛋白定量，如24小時尿蛋白大于30mg即認為DN模型成功，隨機分為模型組(DN)、冬蟲夏草組(CS)，每組各15只。另將15只鼠齡、體重相匹配的大鼠作為正常組(NC)。CS組予冬蟲夏草5.0g/(kg*d)灌胃，NC組等量生理鹽水灌胃。分別于干預(yù)實驗后第2、4、6周（即成模后第6、8、10周）處死大鼠每組5只。處死前留二十四小時尿測蛋白定量及尿NAG酶水平，心臟采血，離心測血清肌酐值。腎組織進行HE及MASSON染色，觀察腎臟組織

3、形態(tài)學變化；用RT-PCR的方法檢測HIF-1α、VEGFmRNA的表達；免疫組織化學方法檢測腎組織中HIF-1α及VEGF蛋白的表達。
　　 結(jié)果：1)與NC組比較，DN各組早期出現(xiàn)腎小球肥大、腎小管空泡變性，隨病程延長，腎小球血管袢塌陷，腎小管病變加重，細胞外基質(zhì)漸增多等病理改變。
　　 2)DN各組大鼠血糖、24小時尿蛋白定量、尿NAG酶水平、血肌酐水平均較正常對照組顯著升高(P均＜0.01)。
　　 3)

4、與NC組比較，DN組腎組織內(nèi)VEGF與HIF-1α的蛋白質(zhì)及mRNA表達均顯著增強(P＜0.01)，HIF-1α主要表達于腎小管及集合管上皮細胞胞漿，腎小球內(nèi)幾乎未見表達；VEGF亦主要表達于腎小管上皮細胞胞漿，腎小球細胞內(nèi)可見少量表達。HIF-1α與VEGF表達呈正相關(guān)(P＜0.01)。
　　 4)CS干預(yù)后，與DN組比較，腎臟肥大、腎小管損傷程度及間質(zhì)損失減輕；尿蛋白定量及尿NAG酶水平、血肌酐水平均有下降(P＜0.01)；

5、同時，腎組織中VEGF、HIF-1α的蛋白質(zhì)及mRNA表達均有下調(diào)(P＜0.01)。
　　 5)CS干預(yù)2、4周、6周后HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白水平均較相應(yīng)模型組下降明顯(P＜0.01)，而絕對表達量仍呈現(xiàn)逐漸升高且明顯高于正常組。但干預(yù)4周和6周后HIF-1α的mRNA及蛋白水平?jīng)]有差別(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：DN出現(xiàn)HIF-1α高表達提示慢性腎組織缺氧是導(dǎo)致DN腎損傷的機制之一；DN時HIF-1