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文檔簡介
1、枳實始載于《神農本草經》,為蕓香科植物酸橙Citrus qurantium L.及其栽培變種或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。具有破氣消積,化痰散痞的功效。主要有效成分為黃酮類、揮發(fā)油類及生物堿類成分。研究表明,不同批次枳實中黃酮類成分存在種類差異,究竟是什么因為引起這種差異還不清楚。不同結構的黃酮類成分生物活性不同。那么,同為枳實中主要有效成分的生物堿和揮發(fā)油成分是否也有差異?本文探討從飲片性狀鑒定品種的可
2、行性,基于枳實品種產地的多樣,從主要黃酮類成分的種類及含量、辛弗林的含量、揮發(fā)油成分的種類及含量、IR吸收特征,分析有效成分種類及含量與品種產地的關系。
系統(tǒng)研究了近50年來國內外枳實的研究概況,并在此基礎上進行了以下實驗研究:
探討從飲片性狀鑒定品種的可行性?!吨袊幍洹?005版枳實項下性狀描述為半球形,少數為球形,直徑0.5~2.5 cm。外果皮黑綠色或暗棕綠色,切面中果皮略隆起,厚0.3~1.2 cm
3、,黃白色或黃褐色,邊緣有1~2列油室,瓤囊棕褐色。依據文獻研究結果,從枳實主產地四川、湖南、江西、貴州采集了30個批次枳實藥材,進行品種鑒定。將藥材自中部橫切為兩半,低溫干燥,測量瓤囊直徑和橫斷面直徑;計算瓤囊面積占橫切面面積的百分比。結果顯示,來源于酸橙及其變種臭橙C.aurantium‘Xiucheng’和枳橙C.aurantium×P.trifoliata枳實的瓤囊面積占橫切面面積的百分比范圍為0.57%~15.0%;香橙枳實的范
4、圍為13.2%~19.9%;甜橙枳實的范圍為20.1%~44.2%;來自江西和重慶枸橘的范圍為25.4%~70.6%,而來自福建枸橘的范圍與甜橙相似。表明以飲片瓤囊面積占橫切面面積百分比為指標,有助于對枳實飲片進行鑒定。
采用RRLC法分析不同品種產地枳實中主要黃酮類成分的種類和含量,確定枳實中黃酮類成分的種類和含量是否與品種和產地有關。
黃酮類成分與品種相關性研究結果顯示,來源于酸橙及其栽培變種臭橙、枳橙和
5、香橙枳實的主要黃酮類成分為橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和柚皮蕓香苷,且酸橙及其栽培變種臭橙、枳橙柚皮苷和新橙皮苷含量高于柚皮蕓香苷和橙皮苷,而香橙則正好相反:來源于甜橙枳實的主要黃酮類成分為橙皮苷和柚皮蕓香苷,不含有柚皮苷和新橙皮苷。
黃酮類成分與產地相關性研究結果表明,不同產地同一品種枳實中黃酮類成分種類和各成分含量范圍無區(qū)別,同一產地不同品種枳實中黃酮類成分種類不同。
目前研究結果表明,枳實中黃酮類成分種類和
6、含量的差異與品種有關,與產地無關。
測定不同品種產地枳實中生物堿辛弗林的含量,探討不同品種產地枳實中辛弗林含量是否存在差異。結果顯示,辛弗林的含量差異與品種和產地沒有明顯相關性。
針對目前枳實品種分類存在的問題,即香橙是否為酸橙的變種問題,采用RRLC法測定了不同品種產地枳實的指紋圖譜,借助中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件和系統(tǒng)聚類軟件,為枳實品種分類提供依據。27個樣品的指紋圖譜分為三類,酸橙及其栽培變種臭橙
7、和枳橙為一類,香橙為一類,甜橙為一類;同品種各批次樣品間相似度很高,均高于0.9;而酸橙與香橙間、酸橙與甜橙間的相似度均低于0.2;香橙與甜橙間的相似度范圍為0.701~0.783。在系統(tǒng)聚類圖中,酸橙、甜橙和香橙各聚為一類。此結果與《中國植物志》分類一致,支持了香橙不屬于酸橙栽培變種的結論。由于香橙在主產地江西產量很大,建議中國藥典單獨將香橙作為枳實的品種來源。
采用RRLC—MS分析枳實中存在的其它黃酮類成分,研究不同
8、品種枳實中是否存在其它成分的差異。采用電噴霧串聯質譜技術[(±)ESI—MSn]分析主要化學成分的裂解特征,獲得了反映結構特征及其差異的質譜裂解規(guī)律。參考多篇國內外相關色譜分析文獻,綜合考慮色譜條件、保留時間、出峰順序、紫外光譜等數據,對酸橙、香橙和甜橙三個品種枳實的指紋圖譜進行色譜峰歸屬。辨認了已知的四種黃酮類成分柚皮蕓香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷。此外,從酸橙中發(fā)現了一個獨有的化學成分,還找到一個酸橙和香橙中含有而甜橙中不包含的成
9、分,它們的具體結構還需進一步確認:從甜橙中新辨認了兩個化合物,為忍冬苷和3ˊ,4ˊ,5,7-四羥基黃酮-7—O-蕓香糖,其中忍冬苷為甜橙中獨有的化學成分:從香橙中新辨認了3ˊ,4ˊ,5,7-四羥基黃酮-7-O-蕓香糖。
采用GC-MS分析揮發(fā)油中的化學成分,探討化學成分的種類及含量是否與品種產地有關。對分析所得成分的質譜數據經數據庫檢索并與有關標準圖譜資料核對定性,運用化學模式識別技術對GC—MS總離子流圖進行分析。聚類結
10、果顯示,所有甜橙枳實聚為一類,酸橙及其栽培變種臭橙和枳橙與香橙枳實聚為一類,香橙的三個樣品聚集為小類,表明枳實揮發(fā)油中的成分與品種有關。此外,同一品種相同產地的差異小于同一品種不同產地。表明枳實揮發(fā)油中成分除與品種有關,還受到產地的影響。
探討采用IR進行品種鑒定的可行性。對黃酮類成分種類存在差異的十個批次枳實進行紅外光譜的測定,采用紅外光譜儀軟件對樣品譜圖進行相關性研究。結果顯示,甜橙三個批次枳實的紅外光譜譜圖與枳實對照
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