馬兜鈴酸A限量檢測標(biāo)準(zhǔn)方法的建立及木通藥材和飲片的國家標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、馬兜鈴酸是硝基菲酸類成分,廣泛存在于馬兜鈴科(Aristolochiaceae)馬兜鈴屬(Aristolochia)植物中。因混用/誤用而服用關(guān)木通引發(fā)了國際焦點(diǎn)——馬兜鈴酸腎病(AristolochicAcidNephropathy,AAN),美國食品藥品監(jiān)督管理局首先提出禁止或限制含馬兜鈴酸及其易混藥材的進(jìn)口,各國也紛紛效仿,給中醫(yī)藥帶來了嚴(yán)重的影響;進(jìn)而還制定了相應(yīng)的限量標(biāo)準(zhǔn),如英國起草的200ng?g-1標(biāo)準(zhǔn),在各方的強(qiáng)烈質(zhì)疑下

2、,執(zhí)行了1μg?g-1的標(biāo)準(zhǔn)。為維護(hù)中醫(yī)藥的聲譽(yù),掌握中藥標(biāo)準(zhǔn)的自主制定權(quán),我們在《中國藥典》2010版的細(xì)辛項(xiàng)下首次提出了適宜于中藥特點(diǎn)的10μg?g-1馬兜鈴酸A(AristolochicAcidA,AA)的標(biāo)準(zhǔn)。
　　為建立限量標(biāo)準(zhǔn),我們以含馬兜鈴酸藥材、可能混淆的或出口受限的中藥品種及其中成藥為研究對象,在系統(tǒng)考察和確定樣品提取方法的基礎(chǔ)上,采用HPLC技術(shù),建立了10μg?g-1馬兜鈴酸A的限量檢測方法,并為1μg?g-

3、1限量檢測奠定了基礎(chǔ),為含馬兜鈴酸A的中藥安全使用提供實(shí)用、快速、準(zhǔn)確的檢測手段。
　　本論文以極微量馬兜鈴酸A為研究對象,圍繞“變微量成分測定為常量分析”的設(shè)計(jì)開展研究,建立適宜于復(fù)雜樣本中微量成分分析鑒別的新模式,為臨床用藥的安全,市場流通和出口保障提供快捷、低成本、易操作質(zhì)量分析方法。具體研究內(nèi)容如下:
　　1.供試樣制備方法采用陰性藥材(木通)與定量加入待測成分(馬兜鈴酸A)作為供試品溶液,對樣品提取溶液的pH值,提

4、取方式,萃取溶劑等,以正交試驗(yàn)的方法,優(yōu)選、驗(yàn)證并確定了制備方法:0.01mol?L-1NaHCO3溶液40倍量超聲提取,調(diào)溶液pH值3.0,氯仿萃取4次,合并萃取液,蒸干,甲醇少量多次溶解,微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液即得。
　　2.10μg?g-1馬兜鈴酸A限量檢測方法學(xué)研究按照中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的方法學(xué)考察的技術(shù)要求進(jìn)行了方法的建立,特別針對分析方法的最低檢測限、最小取樣量和回收率進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:馬兜鈴酸A在0.016～0.51

5、μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,r=0.9993,LOD為4ng,平均加樣回收率為101.2％。
　　3.10μg?g-1馬兜鈴酸A限量檢測法的應(yīng)用采用建立的標(biāo)準(zhǔn)限量檢測法,對11批市售細(xì)辛藥材和15批中成藥樣品中馬兜鈴酸A的含量進(jìn)行了分析,結(jié)果表明:11批細(xì)辛中馬兜鈴酸A的含量在3.1～26.6μg?g-1范圍內(nèi),其中只有3批符合ChP2010細(xì)辛藥材項(xiàng)下的限量要求;15批中成藥樣品中只有1批檢出了馬兜鈴酸A。
　　本方法簡單、合