瘦素-受體在甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生中的作用及其與臨床病理特征的相關(guān)研究.pdf

1、甲狀腺癌是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，其中甲狀腺乳頭狀癌(Papillarythyroid carcinoma，PTC)占75％～85％。近些年，在全球范圍內(nèi)甲狀腺癌的發(fā)病率呈上升趨勢，嚴(yán)重危及人類身體健康。脂肪因子與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，尤其是瘦素/受體與脂聯(lián)素/受體陰陽平衡學(xué)說，對探明腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制具有重要意義。1994年瘦素(Leptin)被發(fā)現(xiàn)，1995年瘦素受體(ObR)首次成功克隆。國內(nèi)外研究表明，Leptin及ObR參

2、與某些惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程，如卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌等。但目前在甲狀腺乳頭狀癌中Leptin及ObR的作用尚不明確，國內(nèi)未見報道。本課題旨在研究PTC組織中Leptin及ObR的表達(dá)和臨床病理特征之間的關(guān)系，并以K1細(xì)胞系為模型，從蛋白和mRNA水平上觀察Leptin及ObR的表達(dá)情況，通過一定濃度的Leptin刺激K1細(xì)胞后，探討對細(xì)胞增殖和侵襲的影響，為探明PTC的分子發(fā)生機(jī)制、基因治療和預(yù)后判斷提供新的思路。
　　

3、目的:研究瘦素及其受體表達(dá)在PTC發(fā)生中的作用及其對腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲的影響，為探明PTC的分子發(fā)生機(jī)制、基因治療和預(yù)后判斷提供理論及實驗依據(jù)。
　　 方法:本課題分兩部分，第一部分應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察PTC組織中瘦素及其受體的表達(dá)及表達(dá)強(qiáng)度，并研究它們的表達(dá)水平與PTC患者的腫瘤的大小，侵襲性，轉(zhuǎn)移性等惡性表型的關(guān)系。第二部分應(yīng)用RT-PCR和Western Blot的方法，在mRNA和蛋白水平觀察在PTC K1細(xì)胞中的瘦

4、素及其受體表達(dá)。應(yīng)用CCK-8方法和Transwell檢測瘦素刺激后對PTC K1細(xì)胞的增殖、侵襲作用的影響。
　　 結(jié)果:免疫組化顯示Leptin在PTC組織中陽性表達(dá)率為72.37％(55/76)，在甲狀腺腺瘤陽性表達(dá)率為56.25％(9/16)，兩組之間無顯著性差異(P＞0.05)。ObR在PTC陽性表達(dá)率為73.68％(56/76)，在甲狀腺腺瘤陽性表達(dá)率為43.75％(7/16)，兩組間差異有顯著性(P＜0.05)。在

5、PTC中Leptin與ObR表達(dá)之間呈正相關(guān)(P＜0.05)。Leptin和ObR在PTC陽性組與陰性組中，腫瘤直徑大小有顯著性差異(P＜0.05)。RT-PCR和Western Blot檢測顯示，K1細(xì)胞中存在Leptin和ObR mRNA及蛋白水平的表達(dá)。CCK-8結(jié)果顯示在高濃度瘦素(25ng/ml，125ng/ml)可以促進(jìn)PTC K1細(xì)胞的增殖。Transwell結(jié)果顯示高濃度(25ng/ml，125ng/ml)瘦素可以增強(qiáng)P