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1、目的:探討SD大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎(Chronic abacterial prostatitis,CAP)炎癥組與正常對(duì)照組前列腺平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度(intracellular calcium[Ca2+]i)的差異及其在慢性非細(xì)菌性前列腺炎中的意義。
方法:將SD大鼠前列腺組織蛋白提取液與氟氏完全佐劑制備抗原液,于0天、第7天皮下多點(diǎn)注射實(shí)驗(yàn)組SD大鼠,且每只大鼠腹腔內(nèi)注射百白破疫苗0.5ml,來(lái)誘導(dǎo)免疫性的慢性非
2、細(xì)菌性前列腺炎癥模型,造模8周后無(wú)菌狀態(tài)下取大鼠前列腺組織,于無(wú)菌超凈臺(tái)上選取背側(cè)葉組織,并剝除前列腺包膜、血管、脂肪等其他組織。每一只大鼠的前列腺組織分為大小兩份,其中小份用于進(jìn)行炎癥的病理學(xué)鑒定;另一份組織采用貼塊法體外培養(yǎng)PSMCs,并用差速貼壁法純化傳代,SP法免疫組織化學(xué)法鑒定細(xì)胞類型。于第二代將細(xì)胞傳入激光共聚焦顯微鏡(LSCM)專用培養(yǎng)皿中,用FLUO-3AM熒光探針培養(yǎng)箱內(nèi)孵育30分鐘,LSCM激發(fā)波長(zhǎng)為488nm連續(xù)動(dòng)
3、態(tài)掃描,觀察細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的變化。并用萊卡圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析。
結(jié)果:鏡下見(jiàn)培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞呈梭形或多邊形,內(nèi)有1-2個(gè)細(xì)胞核,核大居中,傳代純化后后呈束狀排列,符合平滑肌細(xì)胞組織特征。并經(jīng)SP法免疫細(xì)胞化學(xué)染色示α-SMA(+),證實(shí)為PSMCs。病理鑒定提示CAP組前列腺組織在光鏡下發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)典型的炎癥反應(yīng)表現(xiàn),如:間質(zhì)充血水腫,腺管管腔內(nèi)和周?chē)?jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn),對(duì)照組無(wú)明顯炎癥表現(xiàn)。在 CLSM掃描下,慢性前列腺炎
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