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文檔簡介
1、環(huán)維黃楊星D(cyclovirobuxine D,CVB-D)是從黃楊科植物小葉黃楊的木質(zhì)部分分離出的生物堿之一。環(huán)維黃楊星D是我國近年研制成功的一種治療心血管疾病的新藥,具有行氣活血和通絡(luò)止痛功能,主要用于治療氣滯血淤所致的胸痹心痛、脈結(jié)代、冠心病、心律失常等<'[1]>。臨床應(yīng)用顯示,環(huán)維黃楊星D對多種心律失常、心絞痛、冠心病、心功能不全等心血管疾病具有良好的療效<'[2]>。但是機(jī)制如何,相關(guān)報道不多,研究者推斷這些作用和藥物對細(xì)
2、胞膜上離子通道的影響有很大關(guān)系。鈣離子作為細(xì)胞內(nèi)第二信使,在細(xì)胞興奮,肌肉收縮等反應(yīng)中起到重要作用。故本課題通過研究CVB-D對豚鼠離體組織和心肌細(xì)胞收縮力的影響,以及利用熒光技術(shù)觀察CVB-D對心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響,以期探討CVB-D對不同鈣離子通道的作用,從而進(jìn)一步研究CVB-D的作用機(jī)理。 第一部分環(huán)維黃楊星D對離體豚鼠膽道括約肌收縮力的影響 目的:研究環(huán)維黃楊星D(Cyclovirobuxine D,CVB
3、-D)對離體豚鼠膽道括約肌的收縮作用。 方法:1)利用離體豚鼠膽道括約肌,加入不同濃度(1×10<'-7>M-3×10<'-6>M)CVB-D,觀察由KCl或Ach引起的括約肌快速收縮相和持續(xù)相的變化。2)加入維拉帕米(Ver)作用后,再加入CVB-D,觀察二者合用對KCl或Ach引起的括約肌收縮變化。 結(jié)果:對KCl引起的標(biāo)本收縮,CVB-D使快速相峰值顯著下降,且有量效關(guān)系,而持續(xù)相呈輕度升高,坪/峰比值也呈劑量.效
4、應(yīng)的增加。但對Ach引起的收縮,CVB-D使快速相、持續(xù)相、坪/峰值均顯著下降,且有一定量效關(guān)系。Ver使括約肌的快速相及持續(xù)相的收縮力下降。合用CVB-D后,對KCl引起的快速收縮相,二者有協(xié)同作用,峰值進(jìn)一步下降,但坪值則與單用 Ver相當(dāng)。對Ach引起的快速相收縮,二者也有相似的協(xié)同作用,但此時坪值幾乎消失。 結(jié)論:CVB-D對括約肌的收縮作用與引起收縮的刺激劑有關(guān),也與收縮時相有關(guān),反映了CVB-D對不同鈣離子通道的影響
5、。 第二部分環(huán)維黃楊星D對心肌細(xì)胞收縮力的影響 目的:研究環(huán)維黃楊星D(Cyclovirobuxine D,CVB-D)對離體豚鼠心肌細(xì)胞收縮性能的影響。 方法:1)利用離體豚鼠急性分離的心肌細(xì)胞,加入不同濃度(5×lO<'-8>M~1×10<'-6>M)CVB-D,觀察在無鈣和有鈣條件下,CVB-D對心肌細(xì)胞收縮力的影響。2)加入咖啡因作用后,再加入不同濃度(5×10<'-8>M~1×10<'-6>M)CVB-
6、D,在無鈣和有鈣的條件下,觀察CVB-D對咖啡因引起的心肌細(xì)胞收縮力增強(qiáng)的作用。 結(jié)果:1)在細(xì)胞外無鈣條件下,CVB-D可明顯升高心肌細(xì)胞收縮幅度。咖啡因也顯著升高心肌細(xì)胞收縮幅度,但合用CVB-D后,收縮幅度有明顯的下降趨勢;2)在細(xì)胞外有鈣條件下,CVB-D對心肌細(xì)胞收縮幅度影響不大,略有下降趨勢。在此條件下加入咖啡因作用后,細(xì)胞也收縮;CVB-D可使收縮幅度有一定的下降,趨勢弱于無鈣條件下的結(jié)果;3)CVB-D對收縮頻率
7、和收縮幅度的影響不一致。 結(jié)論:CVB-D對心肌細(xì)胞內(nèi)鈣釋放有一定促進(jìn)作用,但其可能是ryanodine受體的部分激動劑,對咖啡因引起的心肌細(xì)胞收縮力增強(qiáng)產(chǎn)生拮抗作用。 第三部分環(huán)維黃楊星D對心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響 目的:研究環(huán)維黃楊星D(Cyclovirobuxine D,CVB-D)對離體豚鼠心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。 方法:1)利用離體豚鼠急性分離的心肌細(xì)胞,加入不同濃度(5×10<'-8>M
8、~1×10<'-6>M)CVB-D,觀察在無鈣和有鈣條件下,CVB-D對心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。2)加入咖啡因預(yù)處理后,再加入CVB-D,在無鈣和有鈣的條件下,觀察CVB-D對咖啡因引起的心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高的影響。 結(jié)果:1)在無鈣條件下,CVB-D可明顯升高心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度。用咖啡因預(yù)處理后也顯著升高心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,再合用CVB-D,內(nèi)鈣離子濃度有明顯的下降趨勢;2)在有鈣條件下,CVB-D對心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離
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