側(cè)孢短芽孢桿菌S62-9微生態(tài)特性研究.pdf

1、近年來，抗生素在養(yǎng)殖業(yè)中的濫用現(xiàn)象日益突出，造成養(yǎng)殖動物機體抵抗力及生產(chǎn)能力下降、致病菌耐藥性增強、動物類食品藥物殘留增加，引發(fā)諸多的食品安全問題，嚴重影響人類健康和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，因此，開發(fā)新型綠色環(huán)保的飼料添加劑已迫在眉睫。微生態(tài)制劑具有無毒副作用、無耐藥性、無殘留以及效果顯著等諸多優(yōu)點，已成為抗生素較為理想的替代品而被廣泛應(yīng)用。
　　本論文以實驗室選育的B.laterosporus S62-9為研究對象，體外評價其主要的微生態(tài)

2、學(xué)特性，為其微生態(tài)制劑的開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。主要內(nèi)容如下:
　　(1)測定了B.laterosporus S62-9在普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，37℃，240 r/min振蕩培養(yǎng)條件下的生長曲線，結(jié)果顯示，B.laterosporus S62-9在0～4h處于延滯期，之后進入對數(shù)生長期，到14 h左右逐漸進入穩(wěn)定期，此后菌落數(shù)基本不再變化，符合微生物典型生長曲線的特征。
　　(2)通過指示平板法測定了B.laterosporus

3、S62-9的抑菌譜，發(fā)現(xiàn)其對17株細菌和2株真菌具有抑制作用，對G+菌的抑菌效果普遍優(yōu)于G-菌，對常見的致病菌如金黃色葡萄球菌、鏈球菌、單增李斯特氏菌和大腸桿菌的抑菌效果較明顯，對益生菌植物乳桿菌不表現(xiàn)抑菌作用。
　　(3)選取了1株藤黃微球菌28001(G+)和1株大腸桿菌CMCC44752(G-)作為指示菌，通過液態(tài)共培養(yǎng)法研究B.laterosporus S62-9對2株菌的抑菌能力。結(jié)果表明，丑laterosporus S

4、62-9對2株指示菌均表現(xiàn)出強烈的抑菌作用，抑菌效果隨其所占接種比例的增加而增強，抑菌機理包括營養(yǎng)競爭作用以及B.laterosporus S62-9產(chǎn)生的抗菌肽的拮抗作用。
　　(4)研究了B.laterosporus S62-9的耐熱性以及對消化道環(huán)境的適應(yīng)性，結(jié)果表明，B.laterosporus S62-9在85℃下水浴5 min，存活率達到（86.2±12.1）％;在pH2.0的人工胃液中作用4h后，存活率達到（85.7

5、±1.1）％;在膽鹽濃度為0.3％的人工腸液中作用4h后，存活率高達（88.3±2.3）％?？梢姡珺.laterosporus S62-9具有良好的耐熱性，減少了制粒過程中的損失;且對消化道環(huán)境具有較好的耐受性，為其在腸道內(nèi)定植并發(fā)揮功效提供了良好的先決條件。
　　(5)體外模擬了B.laterosporus S62-9對Caco-2細胞的黏附作用，發(fā)現(xiàn)1個Caco-2細胞上平均黏附（20.7±3.0）個B.laterosporu

6、s S62-9，與參考菌株相比，表現(xiàn)出良好的黏附特性，并且該菌營養(yǎng)體的黏附能力高于芽孢狀態(tài)。
　　(6)通過微量肉湯稀釋法測定了B.laterosporus S62-9對7大類獸用抗生素的敏感性，結(jié)果表明，B.laterosporus S62-9對常見的獸用抗生素均未產(chǎn)生耐藥性，在生物安全性方面上被認為不存在可轉(zhuǎn)移的抗生素耐藥性基因，是安全的菌株。
　　綜上所述，B.laterosporus S62-9具有廣譜、高效的抑菌特