轉(zhuǎn)脂蛋白基因AsE246在紫云英共生體形成和根瘤器官發(fā)生中的功能機(jī)制研究.pdf

1、根瘤菌在豆科植物根瘤內(nèi)分化形成由宿主植物來(lái)源的膜系統(tǒng)包裹，能夠固氮的細(xì)胞器，被稱為共生體（symbiosome）。但是，對(duì)于這些植物來(lái)源的脂類是如何轉(zhuǎn)運(yùn)至共生體的，所知不多。本研究中，我們對(duì)紫云英根瘤中特異表達(dá)的轉(zhuǎn)脂蛋白AsE246的功能及機(jī)制進(jìn)行了研究。
　　體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，重組AsE246蛋白具有脂質(zhì)結(jié)合能力，能夠和植物細(xì)胞膜上的脂質(zhì)相結(jié)合。更重要的是，我們發(fā)現(xiàn)AsE246在體內(nèi)可以與植物合成的脂質(zhì)雙半乳糖殘基甘油二酯(DG

2、DG)相結(jié)合。在洋蔥下表皮中與紅色熒光蛋白DsRed的融合蛋白表現(xiàn)出膜定位的特點(diǎn)。免疫熒光實(shí)驗(yàn)表明，AsE246基因編碼產(chǎn)物從共生早期階段，侵入線階段就開始與共生體共定位。進(jìn)一步的免疫電鏡檢測(cè)表明，AsE246基因編碼產(chǎn)物定位于共生體膜。結(jié)果表明AsE246基因參與了共生體膜相關(guān)脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)以及共生體形成過(guò)程。AsE246的超表達(dá)導(dǎo)致結(jié)瘤數(shù)增加，而RNAi則導(dǎo)致了結(jié)瘤數(shù)量減少，固氮酶活降低，DGDG含量降低，共生體發(fā)育異常，共生體膜皺縮，