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文檔簡介
1、目的:測定原位肝移植大鼠移植肝肝內(nèi)門-體分流量和肝功能的變化,探討移植肝肝內(nèi)門-體分流量與移植肝功能的關(guān)系。 方法:健康清潔級(jí)封閉群雄性SD大鼠,分為供體組和受體組,采用簡化二袖套法建立大鼠原位肝移植模型(rat orthotopic liver transplantation model,ROLTM)。具體方法為門靜脈(PV)、膽總管原位吻合,其中門靜脈采用袖套法吻合,膽總管采用自制導(dǎo)管直接連接。供肝肝上下腔靜脈(SVC)結(jié)扎
2、,切除受體右腎,供肝肝下下腔靜脈(IVC)與受體右腎靜脈袖套式吻合。ROLTM模型共24只,分為移植后2h、4d、7d三組,每組8只。各組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行肝臟活體在體灌注。經(jīng)小隱靜脈插管連續(xù)灌注D-山梨醇2min后(10mmol/L,0.2ml/min),同時(shí)取門靜脈和肝靜脈血各1.0ml,用酶分光光度法測定山梨醇濃度,計(jì)算肝內(nèi)門-體分流量。取肝靜脈血1ml測定肝功能指標(biāo),包括TBIL,DBIL,AST,ALT,ALB,TP,LDH。然
3、后切取肝臟,常規(guī)石蠟切片,觀察光鏡下肝臟組織形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果:模型總成功率為58.5%(24/41)。其中,2h組成功率80%(8/10),4d組成功率61.5%(8/13),7d組成功率44.4%(8/18)。死亡原因主要為膽道并發(fā)癥(膽瘺、膽道梗阻),術(shù)后感染(肺部感染、腹腔感染、刀口感染),術(shù)后出血及門靜脈、下腔靜脈扭曲或栓塞。2h組、4d組、7d組肝內(nèi)門-體分流量分別為39.9%,52.3%,27.6%,組間差異顯著,
4、且均比正常大鼠明顯增高。2h組ALT、AST、TBIL、DBIL、LDH較正常大鼠升高,ALB、TP則較正常大鼠降低。4d組ALT、AST、TBIL、DBIL、LDH較正常大鼠明顯升高,而ALB、TP則明顯降低。且4d組ALT、AST、TBIL、LDH比2h組增高,ALB、TP則比2h組降低。7d組各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。三組之間差異顯著。三組ROLTM肝內(nèi)門一體分流量與血生化指標(biāo)有明顯相關(guān)關(guān)系,與TP、ALB呈負(fù)相關(guān),與ALT、AST
5、、LDH、TBIL、DBIL成正相關(guān)關(guān)系。 肉眼觀察,2h組大鼠肝臟顏色鮮紅,質(zhì)地柔軟,與正常大鼠肝臟相似;4d組大鼠肝臟明顯腫大,顏色略顯蒼白,質(zhì)地偏硬,但質(zhì)地均一;7d組大鼠肝臟顏色鮮紅,無明顯腫大,質(zhì)地亦柔軟,與正常肝臟基本相同。 光鏡下觀察,各組肝組織匯管區(qū)、中央靜脈、肝細(xì)胞索及肝竇結(jié)構(gòu)均有不同程度的改變。2小時(shí)組可見肝細(xì)胞水腫,部分肝細(xì)胞呈氣球樣變,部分肝細(xì)胞呈嗜酸性變,但無壞死細(xì)胞,肝細(xì)胞索排列整齊,肝竇和中
6、央靜脈內(nèi)可見紅細(xì)胞堆積和不同程度的炎性細(xì)胞浸潤。4d組可見肝細(xì)胞水腫,較多肝細(xì)胞呈氣球樣變或嗜酸樣變,偶可見小灶性壞死,少量肝細(xì)胞索排列紊亂,匯管區(qū)及中央靜脈的分布與相對(duì)位置有變化。7d組肝臟結(jié)構(gòu)基本正常,小葉結(jié)構(gòu)清晰,肝細(xì)胞無明顯變性及壞死,匯管區(qū)及中央靜脈結(jié)構(gòu)無明顯改變。 結(jié)論: 1.ROLTM大鼠移植肝血供恢復(fù)后即存在肝內(nèi)門-體分流,并隨時(shí)間推移分流量變化呈現(xiàn)先增加后減少的過程。 2.ROLTM大鼠門-體分
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