棗縮果病菌的初侵染時期及防治研究.pdf

1、本試驗(yàn)應(yīng)用鏈格孢菌的特異性引物和BOX-PCR指紋圖譜分析技術(shù)研究了從2008-2013年分離自河北、河南和山西省不同地區(qū)的16株鏈格孢菌;通過對鏈格孢菌CN193進(jìn)行硫酸銅抗藥性標(biāo)記得到穩(wěn)定突變體CN193 Cur并接種于林間，研究棗縮果病菌的侵染規(guī)律;篩選了抑制棗縮果病菌的生防菌株，并制成細(xì)菌制劑噴施于林間，調(diào)查各生防菌的防治效果。主要結(jié)果如下:
　　1棗縮果病菌不同菌株的特異性引物擴(kuò)增及其BOX-PCR指紋圖譜分析
　

2、　通過應(yīng)用鏈格孢菌的特異性引物對AAF2/AAR3和Aalt-F/Aalt-R對分離自不同地方、不同時間的16株病原菌進(jìn)行特異性片段的擴(kuò)增，均獲得341 bp和450 bp的DNA特異性片段，表明16株菌株均為鏈格孢屬菌株Alternaria alternata。BOX-PCR指紋圖譜結(jié)果顯示，使用引物BOXAIR擴(kuò)增供試的16株菌株，得到總條帶16條。在相似系數(shù)為0.73時，供試的16個菌株被分為五個遺傳相似組。聚類分析結(jié)果表明利用B

3、OX-PCR技術(shù)可以區(qū)分不同地理分布的16株鏈格孢菌。
　　2棗縮果初侵染病菌Alternaria alternata抗硫酸銅標(biāo)記研究
　　本試驗(yàn)采用平板抑菌圈法篩選出硫酸銅可以作為標(biāo)記棗縮果病菌A.alternataCN193菌株的藥劑，并將培養(yǎng)基中硫酸銅的濃度由1.5 mg/mL逐漸提高至4.5 mg/mL培養(yǎng)菌株對硫酸銅的抗性，得到了穩(wěn)定的抗硫酸銅突變體CN193Cur。通過田間致病性測定并結(jié)合BOX-PCR指紋圖譜分

4、析技術(shù)，檢測了抗硫酸銅突變體CN193 Cur菌株的穩(wěn)定性及侵染時期。結(jié)果表明，硫酸銅抗性可以作為鏈格孢菌的穩(wěn)定標(biāo)記，棗樹花期接種能夠發(fā)病，并再次在病果中分離到突變體菌株CN193 Cupr，說明病菌在花期即能侵入棗樹。本研究首次利用硫酸銅標(biāo)記棗縮果病菌A.alternata，為研究棗縮果病菌在田間的侵染規(guī)律和有效控制該病打下了基礎(chǔ)。
　　3棗縮果病生防菌篩選及防治研究
　　室內(nèi)生防菌篩選試驗(yàn)采用抑菌圈法和菌絲生長抑制法對1

5、1個細(xì)菌菌株進(jìn)行棗縮果病菌A.altrenata的抑制試驗(yàn)，篩選出Y2、Y4、CN181、G1、G4、G6、G87個菌株對棗縮果病菌A.altrenata的生長均有抑制作用，其中Y2、Y4、G1三個生防菌對鏈格孢菌孢子萌發(fā)的抑制作用最明顯。將3種細(xì)菌制成細(xì)菌制劑，按比例稀釋后噴灑到林間，設(shè)置異菌脲為化學(xué)藥劑效果對照。林間防治試驗(yàn)結(jié)果表明:異菌脲的林間防治效果較穩(wěn)定，防治效果達(dá)到80％以上;其次是Y4，防治效果達(dá)到60％以上，與化學(xué)藥劑異