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文檔簡介
1、山東省作為我國無花果(Ficus carica L)早期主要傳入地和栽培地區(qū)之一,已有一百多年的栽培歷史。特別是山東半島一帶,被稱為我國無花果的沿海栽培中心。無花果雖然以無性繁殖為主,但是不同環(huán)境條件下的繁衍盈升,也會造成種內(nèi)變異的多樣性。而且,在很多地區(qū)都是庭院栽培,一些特殊的基因資源極有可能還未得到認識和利用。所以,很有必要對分布地區(qū)的無花果資源進行勘察和搜集保存,展開其多樣性研究,尤其是對種質(zhì)間的遺傳差異從分子水平提供更為直接的證
2、據(jù),為進一步有效的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
本研究利用RAPD(Random Amplification Polymorphism DNA)標記技術(shù),對從山東省境內(nèi)不同地區(qū)搜集到的無花果資源的多樣性進行了評估。并對與葉形相關(guān)的分子標記進行了研究。另外,利用RAPD和SSR(Simple Sequence Repeat)兩種分子標記技術(shù)構(gòu)建部分無花果品種的DNA指紋圖譜。
獲得如下研究結(jié)果:
1.通過對
3、8個市近20個鄉(xiāng)鎮(zhèn)(社區(qū))的考察搜集,共搜集無花果資源66份,現(xiàn)田間保存資源31份共55株。
2.通過15個隨機引物在58份資源上的RAPD分析,將所搜集的資源分為23個不同的基因型。隨后又從120個隨機引物中篩選出28個多態(tài)性高的引物,進一步對這23個基因型無花果進行RAPD多樣性分析。共檢測到309個清晰的位點,擴增片段范圍在200bp~2500bp之間。其中多態(tài)性位點為236個,共有位點為73個,位點多態(tài)性比率為76
4、.4%。利用NTSYS-pc分析軟件分析了這23個基因型間的遺傳相似系數(shù)。計算結(jié)果表明,絕大多數(shù)基因型之間遺傳相似性較高,但其中之一與其它基因型資源的相似系數(shù)較低,可見其遺傳背景比較特殊。利用UPGMA法構(gòu)建了聚類樹狀圖,當閾值為0.760時,可將23個基因型聚為五類。
3.在對無花果的多樣性進行分析的過程中,鑒定出兩個與基部非心形/心形葉形相連鎖的標記:S20821640、S21041614。這兩個標記經(jīng)SCAR轉(zhuǎn)化后,
5、前者的多態(tài)性依然存在,可作為資源鑒定的有效手段。而后者在不同葉形間的多態(tài)性消失,對于這一問題,我們還會做進一步的研究。
4.利用RAPD和SSR兩種分子標記技術(shù),對收集到的11個無花果品種的DNA指紋進行了分析。經(jīng)過28個隨機引物的分析,最終區(qū)分出其中的三個品種,并將剩下的8個品種分為三組。其中,引物S1259的區(qū)分效率最高。通過8對SSR引物的擴增分析,多態(tài)性較高的引物MFC1和MFC4均能鑒定出其中的兩個品種。將這兩對
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