南方地區(qū)無(wú)核葡萄胚挽救影響因子研究.pdf

1、無(wú)核葡萄基本無(wú)核或僅帶有小而軟的殘核，果皮薄，風(fēng)味好，在鮮食、制干或者制罐方面都占有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。隨著無(wú)核葡萄市場(chǎng)需求逐年增加，生產(chǎn)品種供給不足，無(wú)核葡萄的育種成為葡萄育種研究的重要方向。但是，因無(wú)核葡萄合子胚中途敗育無(wú)法得到種子使傳統(tǒng)育種難度增大，只能以有核品種作為母本與其雜交，后代無(wú)核比率低且育種時(shí)間長(zhǎng)。胚挽救技術(shù)作為無(wú)核葡萄育種的重要手段，因其局限性小，周期短效率高，得到越來(lái)越廣泛的重視和應(yīng)用，關(guān)于胚挽救程序及影響

2、因子的研究也日益深入。
　　本試驗(yàn)以5個(gè)無(wú)核品種為試材，通過(guò)對(duì)形態(tài)學(xué)特征的觀察和胚培養(yǎng)條件的研究，篩選最佳取樣時(shí)間和母本基因型，探索胚挽救的最佳條件，并對(duì)繼代培養(yǎng)和移栽煉苗進(jìn)行深入分析，對(duì)南方地區(qū)的胚挽救技術(shù)加以完善。主要研究?jī)?nèi)容和取得結(jié)果如下:
　　1、對(duì)火焰無(wú)核、奧迪亞無(wú)核、紅寶石無(wú)核、碧香無(wú)核、SP557進(jìn)行形態(tài)學(xué)測(cè)定，結(jié)合物候期，并進(jìn)一步利用胚培養(yǎng)試驗(yàn)確定了南方地區(qū)無(wú)核葡萄進(jìn)行胚挽救的取樣時(shí)間和基因型。結(jié)果表明，多數(shù)

3、歐亞種無(wú)核葡萄為花后30～40d，紅寶石無(wú)核雜交種為授粉后40～50d;適宜進(jìn)行胚挽救的基因型有火焰無(wú)核、碧香無(wú)核和奧迪亞無(wú)核，其中火焰無(wú)核×寒香蜜成苗率最高可達(dá)60％以上。
　　2、以火焰無(wú)核為主要材料，對(duì)物候期及生長(zhǎng)結(jié)實(shí)特性進(jìn)行調(diào)查，并在前期研究的基礎(chǔ)上，對(duì)果實(shí)單果重和種子重量、數(shù)目、縱橫徑以及外觀形態(tài)進(jìn)行了相關(guān)性分析，觀察胚珠的敗育過(guò)程，確定了開(kāi)始敗育時(shí)間為花后31d。
　　3、確定了初代培養(yǎng)的影響因素。以火焰無(wú)核×寒

4、香蜜雜交幼果為試材，對(duì)胚挽救初代培養(yǎng)過(guò)程中的影響因子如培養(yǎng)基、接種時(shí)間、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度、培養(yǎng)環(huán)境等進(jìn)行研究。結(jié)果表明，最佳胚珠取樣時(shí)間在授粉后35d，最佳培養(yǎng)條件為:液態(tài)B5培養(yǎng)基+60g/L蔗糖+1.0mg/L GA3+0.2mg/L6-BA+2.0mg/L IBA+1g/LAC，培養(yǎng)環(huán)境為光暗培養(yǎng)。另外，花前進(jìn)行摘心、環(huán)剝和250mg/L烯效唑處理可以明顯提高胚發(fā)育率和成苗率，接種前進(jìn)行10d的4℃低溫處理也可以優(yōu)化胚挽救的效果。<

5、br>　　4、確定了繼代培養(yǎng)的最佳條件。研究了火焰無(wú)核×寒香蜜胚挽救苗繼代過(guò)程中的影響因素，包括培養(yǎng)基、激素濃度和接種方式。研究結(jié)果表明:在培養(yǎng)基中添加IBA有利于幼苗生長(zhǎng)，其中0.2mg/L效果最好。綜合分析確定繼代培養(yǎng)基為:1/2WPM+0.2mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂+2.5g/L AC，采用雙芽接種。
　　5、建立了胚挽救苗程序移栽法。采用‘培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)密閉2d→培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)開(kāi)口2d→出培養(yǎng)瓶7d→自然7d’的