β-catenin和c-myc在翼狀胬肉及成纖維細胞中的表達研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文B—catenin和c—myc在翼狀胬肉及成纖維細胞答辯委員會主席：答辯委員會組成：中的表達研究專業(yè)名稱：眼科學學位申請人：潘竹娟指導老師：吳開力教授裝噸齦t吆＆病的蛋白質(zhì)組研究)和廣州市科技計劃項同(淚液蛋白變化與翼狀胬肉的關(guān)系)資助中山大學碩士學位論文Bcatenin和cmyc在翼狀胬肉及成纖維細胞中的表達2、利用免疫組化法檢測胬肉組織和正常結(jié)膜組織中Bcatenin及cmyc蛋白的表達差異。3、通過組織塊培養(yǎng)獲

2、取成纖維細胞傳至第四代，應(yīng)用相差顯微鏡和MTT法觀察比較正常球結(jié)膜與翼狀胬肉成纖維細胞生長增殖狀況。4、細胞免疫化學及免疫印跡法檢測正常球結(jié)膜與翼狀胬肉成纖維細胞中Bcatenin及cmyc蛋白表達的差異。5、用10ng／mlTGF且l作用于正常球結(jié)膜與翼狀胬肉成纖維細胞，24小時后，用免疫印跡法比較Bcatenin及cmyc的表達變化。結(jié)果：1、對前人關(guān)于翼狀胬肉的基因芯片結(jié)果利用KEGG分析工具進行分析發(fā)現(xiàn)：有五個wnt通路相關(guān)蛋白

3、基因上調(diào)。2、Bcatenin在胬肉組織中較多，且多分布于上皮下纖維血管組織，上皮染色較少。而在正常結(jié)膜組織中13catenin多分布于上皮細胞膜處，上皮下較少。cmyc在胬肉組織中的表達也較多，但在上皮及上皮下組織中均有表達。3、相差顯微鏡觀察顯示第一天及第二天細胞生長密度無差異，第三天起逐漸有差別。MTT檢測結(jié)果顯示，第四代的翼狀胬肉與正常結(jié)膜成纖維細胞于接種后第一天和第二天的細胞數(shù)相比無統(tǒng)計學差異(pO05)。但在第三、四、五天，

4、翼狀胬肉成纖維細胞的生長較正常結(jié)膜成纖維細胞快、增殖能力強，細胞總數(shù)多于正常結(jié)膜成纖維細胞(po05)4、正常球結(jié)膜與翼狀胬肉成纖維細胞中Bcatenin及cmyc均可見陽性著色，以胞漿內(nèi)為主。且在翼狀胬肉成纖維細胞中兩種抗體染色均強于正常結(jié)膜成纖維細胞。免疫印跡法顯示在翼狀胬肉成纖維細胞蛋白中Bcatenin及cmyc的特異性陽性條帶灰度值均高于正常球結(jié)膜成纖維細胞蛋白。5、經(jīng)10ng／mlTGFB1作用24h后，正常球結(jié)膜成纖維細胞