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1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文白血病細(xì)胞Survivin表達(dá)與耐藥的關(guān)系及藥物調(diào)節(jié)姓名:李中東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:齊振華20040401和Arac是否具有同樣作用,尚不清楚。細(xì)胞的凋亡涉及到一系列復(fù)雜的生化反應(yīng)并受多種分子調(diào)節(jié)。目前已證實(shí),在哺乳動(dòng)物細(xì)胞色素C(Cytc)是一種線粒體釋放的促凋亡蛋白,當(dāng)其從線粒體膜內(nèi)側(cè)移位到細(xì)胞質(zhì)時(shí),與凋亡活化因子(Apaf1)以2:1的比例結(jié)合,即可活化Caspase9,啟動(dòng)凋亡。國(guó)外已有人
2、采用顯微注射的方法將Cytc注入腎上腺皮質(zhì)v1腫瘤細(xì)胞、正常大鼠上皮細(xì)胞、早幼粒IPC一81白血病細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi),可導(dǎo)致這些細(xì)胞凋亡。而針對(duì)Survivin的反義寡核苷酸在誘導(dǎo)急性髓性白血病(AML)細(xì)胞凋亡時(shí),伴有Cyte釋放增加。但外源性Cytc直接作用于白血病細(xì)胞是否能誘導(dǎo)凋亡,它對(duì)Survivin表達(dá)是否有影響,均有待進(jìn)一步研究?;谏鲜鲈?,本研究首先采用RTPCR方法檢測(cè)了急性白血病患者Survivin與mdrl的表達(dá),以探討S
3、urvivin表達(dá)與耐藥的關(guān)系。繼而應(yīng)用VPl6、Amc、Cytc及GCSF四種藥物分多組干預(yù)HL60白血病細(xì)胞株,通過(guò)觀察上述藥物對(duì)HL60細(xì)胞增殖、凋亡以及Survivin表達(dá)的影響,期待能進(jìn)一步探討VPl6、AraC抗白血病作用的分子機(jī)制。第一部分:急性白血病患者Survivin基因表達(dá)與耐藥的關(guān)系目的:探討急性白血病(AL)患者Survivin基因表達(dá)及其與臨床耐藥的關(guān)系。方法:應(yīng)用半定量RTPCR方法檢測(cè)71例急性白血病患者,
4、10例健康受試者的Survivin、mdrl基因mRNA表達(dá)水平,并分析其臨床意義。結(jié)果:AL患者Survivin、mdrlmRNA表達(dá)陽(yáng)性率分別為67,61%(48/7l例)和4930%(35/71例)。急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和急性非淋巴細(xì)胞白血病(√心兒L)患者SurvivinmRNA表達(dá)陽(yáng)性率(分別為72oo%和6522%)均高于對(duì)照組(2000%,分別為P001,P005)。半定量后進(jìn)行方差分析,ANLL和ALL患者Sur
5、vivinmRNA表達(dá)水平(分別為064021,0。63015)均高于對(duì)照組(0。33001,P0。05)。耐藥組患者SurvivinmRNA表達(dá)陽(yáng)性率(7813%)高于敏感組(48,00%,P005)。Survivinmdrl患者耐藥比例(7308%)明顯高于Survivin—mdrl一患者(3125%,P001)。在61例初治和復(fù)發(fā)AL患者SurvivinmRNA表達(dá)水平和mdrlmRNA表達(dá)水平呈高度正相關(guān)(r=0754,O01)
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