Survivin基因在白血病GC敏感型和GC耐藥型細胞株中的表達差異及意義.pdf

1、目的：Survivin幾乎在所有人類的腫瘤細胞中都有表達，其具有很強的抗凋亡功能。糖皮質(zhì)激素（GC）耐藥是兒童急性淋巴細胞性白血?。ˋLL）危險度分層診斷中的一個獨立的預后不良因素。目前對于GC耐藥的具體機制不完全清楚。近來，一些研究表明凋亡途徑的異常是腫瘤細胞耐藥的新機制。本實驗在細胞株水平探討Survivin基因在GC敏感型（CEM）和GC耐藥型（Jurkat）白血病細胞株中的表達差異以及其在GC暴露前后表達的變化規(guī)律，旨在揭示GC

2、耐藥可能的新機制，為臨床上兒童ALL的診治提供新的思路。
　　 方法：模擬GC敏感和耐藥兩類白血病細胞在初診時和治療中的表達將實驗分為GC未暴露組和GC暴露組，并設(shè)陰性對照及空白對照。應用MTT法檢測抑制細胞增殖；流式細胞術(shù)分析細胞凋亡情況；RT-PCR法檢測兩株細胞暴露前后Survivin基因mRNA表達水平；Westernblot法分析兩株細胞暴露前后Survivin基因翻譯的蛋白水平。
　　 結(jié)果：1）MTT結(jié)果顯

3、示：DEX以劑量、時間依賴方式抑制CEM和Jurkat細胞株增殖。CEM和Jurkat的24h抑制細胞增殖5O％的藥物濃度（IC50）分別為442μmol/l，13μmol/l(P<0.01)；CEM和Jurkat的48h IC50分別為273μmol/l和3μmol/l(P<0.01)。DEX對Jurkat的抑制增殖效應遠較CEM差。2）流式結(jié)果證實：DEX對Jurkat的誘導凋亡作用遠低于CEM（P<0.01），Jurkat在100

4、μmol/l DEX暴露48h后才出現(xiàn)明顯的凋亡現(xiàn)象。3）mRNA和蛋白水平結(jié)果均顯示：未暴露組Jurkat細胞株Survivin表達水平較CEM高(P<0.05)。暴露組CEM細胞株Survivin表達變化較Jurkat細胞株顯著(P<0.01)。
　　 結(jié)論：研究通過模擬GC敏感和耐藥兩類白血病細胞在初診時和治療中的表達發(fā)現(xiàn)：GC未暴露組中，Survivin基因在GC耐藥型白血病細胞株中的表達較GC敏感型高，可能預示Surv