HMGA1基因在急性白血病的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、高遷移率族蛋白A(HMGA)是一組非組蛋白,在人體中分布廣泛,含量豐富,進(jìn)化中高度保守的蛋白質(zhì),可以結(jié)合DNA和幾種轉(zhuǎn)錄因子,參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)節(jié),調(diào)控與腫瘤相關(guān)的多種基因的活化和轉(zhuǎn)錄。主要功能有：促進(jìn)胚胎期細(xì)胞的生長、發(fā)育;參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控;參與細(xì)胞轉(zhuǎn)化和一些腫瘤的發(fā)生;抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡。研究表明HMGA1在多種惡性實體腫瘤中高表達(dá),如甲狀腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、子宮頸癌、卵巢癌、胰腺癌等,其表達(dá)水平的高低與部分腫瘤的惡性程

2、度相關(guān),對預(yù)后估計具有重要意義。HMGA1在白血病患者及其細(xì)胞系中有異常高表達(dá),其促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化,以癌基因形式在白血病發(fā)病中起重要作用。
　　 目的：①建立SYBR GREEN I RQ-PCR檢測急性白血病中HMGA1mRNA表達(dá)的方法。②檢測急性白血病與對照組及各類急性白血病之間HMGA1基因表達(dá)方面的差異。③探討急性白血病原始細(xì)胞數(shù)與HMGA1mRNA表達(dá)水平之間的關(guān)系。④動態(tài)檢測HMGA1mRNA在急性白血病病程中的變

3、化,以探討其在白血病療效考核及監(jiān)測殘留病灶方面的價值。
　　 方法：⑴建立YBR GREEN RQ-PCR方法,檢測30例初診AL,包括25例AML(M2～M7)和5例ALL(AL組),25例非白血病患者(對照組)外周血HMGA1mRNA表達(dá)水平。⑵病例組外周血涂片、染色鏡檢進(jìn)行外周血分類,計算出外周原始、幼稚細(xì)胞數(shù)。⑶分析病例組與對照組HMGA1 mRNA表達(dá)差異及病例組各FAB分型間表達(dá)差異。⑷分析病例組原始細(xì)胞絕對值計數(shù)與

4、HMGA1mRNA表達(dá)水平之間的關(guān)系。⑸按治療后2、3、4個月動態(tài)檢測兩例M5 HMGA1mRNA及骨髓象。
　　 結(jié)果：①所構(gòu)建SYBR GREEN RQ-PCR檢測HMGA1 mRNA方法的循環(huán)闡值(CT)與該模板的起始拷貝數(shù)的負(fù)對數(shù)存在良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)0.994,且重復(fù)性好,方法敏感度可達(dá)10pg,特異性強(qiáng),日內(nèi)及日間變異度均小于1096。②AL組HMGA1 mRNA表達(dá)經(jīng)GAPDH校正后其HMGA1mRNA表達(dá)水

5、平(31.59±17.7％),與對照組(0.77±1.66％)比較,兩組比較有非常顯著性意義(P＜0.01)。③ALL組(25.67±10.25％)和AML(32.78±18.79％)間HMGA1 mRNA表達(dá)水平無顯著差異性(P＞0.05)。④AML中M7的HMGA1 mRNA表達(dá)水平(79.67±12.86％)高于M2～M5(M2:22.40±7.02％,M3:31.01±16.59％,M4:32.81±8.61％,M5:28.02

6、±15.97％)。⑤外周血原始細(xì)胞絕對值與HMGA1 mRNA表達(dá)水平無相關(guān)關(guān)系。⑥動態(tài)檢測顯示,兩例M5患者治療后骨髓象均完全緩解,但一例HMGA1mRNA仍處于高水平,在2、3、4月分別為14.6％、13.5％、20.7％,骨髓原始細(xì)胞比例分別為0.5％、2.5％、22％,患者在4個月后復(fù)發(fā),而另一例沒有檢測到HMGA1表達(dá)的病例未見復(fù)發(fā)。
　　 結(jié)論：⑴所建立的SYBR GREEN I RQ-PCR方法檢測HMGA1mRN