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文檔簡介
1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文小兒急性白血病BcL2基因、BAX基因表達及臨床意義姓名:何莉申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:郭承吉2000.4.15歲一10歲。二.實驗儀器和試劑主要試劑及儀器:Ficol淋巴細胞分離液購于上海試劑二廠Trizol購于GIBCOBRLUSA反轉(zhuǎn)錄試劑盒購于上海Sangon公司TaqDNA聚合酶dNTP購于大連TAKARA公司德國PCR擴增儀等。引物由上海Sangon公司合成。實驗方法一標本采集:于化療前
2、采集肝素抗凝骨髓2mlo二.骨髓中分離單個核細胞:采用Ficol密度梯度離心分離單個核細胞。三.RT一PCR方法檢測BcL一2基因、BAX基因表達:按照Trizol試劑盒說明提取總RNA,按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA第一鏈后PCR擴增。3種基因的cDNA引物序列分別為:BcL2引物序列,上游引物5’一GGATGTGGCCTTCTTGAG一3下游引物5一CCAAACTGAGCAGAGTCTTC一3產(chǎn)物233bpBAX引物序列,上游引物5’一
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