海南省椰心葉甲綠僵菌研究.pdf

1、本文研究結(jié)果如下： 1.對海南省部分市縣的椰樹進行隨機取樣調(diào)查，由于各地區(qū)的防治工作、地形差異及氣候等共同影響，使椰心葉甲在各地發(fā)生危害程度有所不同，其中災(zāi)情最嚴重的是海口和三亞；同時，發(fā)現(xiàn)綠僵菌在各地對椰心葉甲均有寄生現(xiàn)象，但在自然環(huán)境中的寄生率偏低。 2.從野外采集椰心葉甲僵蟲進行分離，利用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，對該菌進行了分離培養(yǎng)。對不同生長發(fā)育天數(shù)的菌落特征即顏色、大小、孢子堆的形成等特點進行了描述。在光學(xué)顯微

2、鏡下觀察了菌絲的形態(tài)，成熟孢子及分生孢子梗的形狀、顏色及連接狀況。經(jīng)培養(yǎng)特征和形態(tài)學(xué)鑒定，確定該昆蟲病原真菌是綠僵菌屬的真菌。 3.測定了不同地理來源的8個綠僵菌菌株rDNA-ITS序列，對8個菌株的ITS進行了克隆和測序，并將之與GenBank已登錄的ITS序列進行比較，發(fā)現(xiàn)與金龜子綠僵菌小孢變種(Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae)有很高的同源性，達到94.2％，且測出全長為547bp，說

3、明8個菌株是金龜子綠僵菌小孢變種；并與其它不同變種綠僵菌菌株的rDNA-ITS序列一起進行系統(tǒng)發(fā)育分析，所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹將其中8個菌株聚在金龜子綠僵菌小孢變種分支上，從而在分子水平上確定了分離菌株為金龜子綠僵菌小孢變種。 4.測定了8株綠僵菌的生物學(xué)特性，結(jié)果表明：綠僵菌在以玉米粉作碳源，牛肉膏、蛋白胨作氮源的條件下菌絲的生長速率最快，產(chǎn)孢量最高；綠僵菌對溫度和pH的適應(yīng)范圍較廣，最適宜的生長溫度是26～28℃；pH為6～7時

4、，菌絲生長最快，孢子量最多。55℃，處理10分鐘，菌絲失去生長能力、不能長成菌落，表明，綠僵菌的致死溫度為55℃。 5.測定了不同菌株、不同孢子懸浮液濃度對椰心葉甲的致死中時LT50，進行相關(guān)分析和回歸分析，致病性測定結(jié)果表明，不同來源的綠僵菌菌株對椰心葉甲致病力差異明顯：在相同濃度下處理椰心葉甲成蟲、幼蟲、蛹，結(jié)果顯示SY-2、WC-1、SX-2、HK-5等4個菌株對椰心葉甲各蟲態(tài)的毒力效果均比QH-4、HY-4、YP-6、S