綠僵菌和殺蟲劑協(xié)同抑制飛蝗免疫研究.pdf

1、飛蝗作為重要的農(nóng)業(yè)害蟲之一，對我國農(nóng)作物及牧草的為害較大。金龜子綠僵菌作為一類重要的生物防治真菌，具有致病力強(qiáng)，對人、畜及農(nóng)作物無害，在對飛蝗的防治過程中已得到廣泛應(yīng)用。由于綠僵菌對昆蟲的毒力作用過程緩慢，實(shí)際應(yīng)用中又受環(huán)境因素、施藥方式、制劑質(zhì)量的影響，達(dá)不到預(yù)期的防治效果。因此在本實(shí)驗(yàn)中將低劑量殺蟲劑與金龜子綠僵菌聯(lián)合施用防治飛蝗，并對其作用效果及增效原因進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1.在相同的飼養(yǎng)條件下與田間種群比較，

2、飛蝗純化種群具有較高的孵化率、存活率、產(chǎn)卵量、凈增殖率和內(nèi)稟增長率。純化種群中全酯酶ESTs、酚氧化酶PO、乙酰膽堿酯酶AChE、過氧化物酶POD和過氧化氫酶CAT的酶活力值都集中分布，純化后的飛蝗遺傳背景單一，基本滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)中與病原真菌的免疫研究。
　　2.將綠僵菌和多種殺蟲劑以2∶8或8∶2聯(lián)合作用于飛蝗，處理7天后檢測兩者的作用效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠僵菌和新煙堿類殺蟲劑環(huán)氧蟲啶及吡蟲啉聯(lián)合存在增效作用;綠僵菌和有機(jī)磷類殺蟲劑馬拉

3、硫磷、擬除蟲菊酯類殺蟲劑高效氯氰菊酯和生長調(diào)節(jié)劑類甲氧蟲酰肼以8∶2聯(lián)合作用都具有增效作用;綠僵菌和酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺以8∶2和5∶5聯(lián)合具有增效作用。
　　3.將綠僵菌和多種殺蟲劑聯(lián)合作用于飛蝗，處理7天后檢測飛蝗體內(nèi)生化酶活力變化，經(jīng)分析可知飛蝗體內(nèi)多功能氧化酶MFO酶活力都升高，可能與綠僵菌和環(huán)氧蟲啶或吡蟲啉聯(lián)合增效有關(guān)。MFO和PO酶活力都升高，可能與綠僵菌和馬拉硫磷在8∶2時(shí)增效有關(guān)。MFO酶活力升高，PO酶活力降

4、低可能與綠僵菌和高效氯氰菊酯在8∶2時(shí)增效有關(guān)。MFO、ESTs和AChE酶活力升高可能與甲氧蟲酰肼和綠僵菌增效有關(guān)。
　　4.不同濃度綠僵菌和氯蟲苯甲酰胺連續(xù)處理飛蝗6天，并測定相關(guān)10種生化酶活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者協(xié)同抑制侵染前期谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶GST、ESTs和PO及侵染后期超氧化物歧化酶SOD，POD和CAT酶活力。而激活侵染前期芳基酰胺酶AA和幾丁質(zhì)酶CHI及侵染后期AChE酶活力影響寄主死亡率。綠僵菌和氯蟲苯甲酰胺協(xié)同可以

5、有效抑制寄主體內(nèi)生化酶參與的寄主免疫，飛蝗死亡率升高可能與寄主鈣離子失衡相關(guān)。
　　5.在本實(shí)驗(yàn)中通過對飛蝗免疫相關(guān)基因表達(dá)調(diào)控分析，綠僵菌和氯蟲苯甲酰胺協(xié)同抑制寄主識(shí)別蛋白GNBP1對綠僵菌的免疫識(shí)別，抑制Toll和dMyD88參與抗菌肽合成信號(hào)傳導(dǎo)，抑制酚氧化酶原PPO1和PPO2參與酚氧化酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)，GNBP1和Toll可能是綠僵菌抑制寄主免疫的分子靶標(biāo)。本研究初步探索了殺蟲劑和綠僵菌協(xié)同作用對飛蝗免疫的影響，為今后綠僵菌解