神經(jīng)遞質(zhì)和生物活性胺對MDCK單層模型上丙磺舒轉(zhuǎn)運的影響.pdf

1、藥物從給藥部位進入機體,要跨過細胞膜屏障轉(zhuǎn)運、代謝及排泄作用,才能在起效部位達到較為穩(wěn)定的濃度產(chǎn)生作用。腎臟作為機體重要的清除器官,能將外源和內(nèi)源途徑吸收、產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)及其代謝物排至體外。腎小管重吸收和分泌過程有轉(zhuǎn)運蛋白介導(dǎo)。MDCK細胞來源于犬腎遠曲小管,是研究腎遠端小管排泄功能的理想工具。
　　 本文目的：
　　 利用MDCK細胞單層模型,以有機酸類藥丙磺舒(Probenecid,PBD)為模型藥,研究神經(jīng)遞質(zhì)對腎

2、遠曲小管細胞模型上藥物轉(zhuǎn)運的調(diào)節(jié)。
　　 本文采用下述方法研究：
　　 (1)建立MDCK細胞單層模型,考查PBD在該模型上的轉(zhuǎn)運情況,探討其跨細胞吸收與分泌方式;
　　 (2)探索神經(jīng)遞質(zhì)和生物活性胺對PBD在MDCK細胞單層模型上的轉(zhuǎn)運的影響,分析其機制。
　　 實驗結(jié)果：
　　 (1)MDCK細胞模型上PBD的表觀通透系數(shù)(Papp)均大于1×10-5cm/s,且分泌組的Papp顯著高于吸收

3、組Papp,說明在MDCK細胞模型上有較強的分泌能力,證明有機酸類藥物在腎遠端小管既有分泌也有重吸收,分泌能力大于吸收,其結(jié)果是PBD的凈分泌;
　　 (2)腎上腺素抑制PBD在腎遠曲小管上的重吸收和分泌,但抑制程度不同,但去甲腎上腺素和異丙腎上腺素對PBD的轉(zhuǎn)運基本無影響,其原因尚難以解釋;
　　 (3)5.羥色胺、多巴胺對PBD的分泌有明顯抑制作用,而對吸收無顯著性影響,提示PBD分泌和吸收轉(zhuǎn)運過程并非由同一種轉(zhuǎn)運蛋

4、白介導(dǎo);
　　 (4)同側(cè)給予多巴胺受體阻滯劑氟哌啶醇,對多巴胺預(yù)處理過的MDCK上PBD的分泌具有明顯的抑制作用,根據(jù)介導(dǎo)有機陰離子分泌的OATs主要為OATl和OAT3以及PBD為OAT3競爭性底物,明確多巴胺對OAT3的抑制作用;
　　 (5)使用腎上腺素、5.羥色胺、多巴胺調(diào)節(jié)MDCK細胞蛋白磷酸酶活性后顯著的減少:PBD的累積分泌,說明ONI、會受到蛋白磷酸化的調(diào)節(jié)。
　　 得到下述結(jié)論：