穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

1、<p>　　穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響</p><p>　　【摘要】 觀察穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響?！痉椒ā繉D大鼠36只隨機(jī)分為埋線組、氯氮平組和空白對照組。除空白對照組外，其他2組大鼠均灌胃氯氮平，由5mg·kg-1·d-1漸增至30mg·kg-1·d-1，而后遞減至22mg·kg-1·d-1，

2、并維持至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。服用氯氮平60d后埋線組選取兩組穴位：①百會、心俞（雙）、曲池（雙）；②大椎、脾俞（雙）、足三里（雙），交替埋線，每5d治療1次，共12次。觀察各組大鼠治療前后體質(zhì)量變化，并檢測下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺（DA）和5羥色胺（5HT）的含量。【結(jié)果】長期服用氯氮平可使大鼠體質(zhì)量顯著性增加，DA和5HT含量顯著性降低（均P＜0.05或P＜0.01），而穴位埋線治療可顯著性抑制大鼠體質(zhì)量的增加，升高下丘腦中DA和5H

3、T的含量（P＜0.05）?！窘Y(jié)論】穴位埋線減輕氯氮平副作用的機(jī)制可能與其能升高下丘腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量有關(guān)。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 穴位埋線/治療應(yīng)用 精神障礙/穴位療法 單胺類神經(jīng)遞質(zhì) 疾病模型 動物 大鼠 </p><p>　　氯氮平（clozapine)是非典型的抗精神病藥，其價格低廉、療效確切，是臨床上治療難治性精神科疾病的常用藥。但長期使用易導(dǎo)致肥胖、血糖血脂

4、異常等一系列的副反應(yīng)，有報道認(rèn)為［1］其機(jī)理可能與神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌有關(guān)，抗精神病藥物通過抗腎上腺素、阻斷多巴胺（DA）受體以及拮抗5羥色胺（5HT）等而引起體質(zhì)量增加。在臨床實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)穴位埋線療法能夠改善患者因服用氯氮平而引起的體質(zhì)量增加，但其具體機(jī)制不清楚，查閱中外文獻(xiàn)亦尚未發(fā)現(xiàn)有學(xué)者報道。我們進(jìn)行了該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究，以期發(fā)現(xiàn)穴位埋線療法改善氯氮平副作用的可能機(jī)制?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。 </p><p>

5、;<b>　　1 材料與方法 </b></p><p>　　1.1 動物 清潔級SD大鼠36只，雄性12只（246±12）g，雌性24只（250±9）g，廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號為SCXK（粵）20060001。所用飼料為普通全價飼料，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。 </p><p>　　1.2 藥物及試劑 氯氮平片

6、劑為徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號：20050816；治療用羊腸線為上海蒲東金環(huán)醫(yī)療用品有限公司產(chǎn)品，規(guī)格：40，標(biāo)準(zhǔn)號：YY911161999；腦組織各項(xiàng)指標(biāo)由廣州中醫(yī)藥大學(xué)臨床藥理教研室負(fù)責(zé)檢驗(yàn)。 </p><p>　　1.3 主要儀器和工作條件 DIONEX Summit高效液相色譜儀（HPLC，美國DIONEX公司）；Chromeleon色譜工作站（美國DIONEX公司）；HP1049A電

7、化學(xué)檢測器（美國安捷倫公司）；RC5C低溫高速離心機(jī)（美國杜邦公司）；PHS2C精密酸度計(jì)（上海理達(dá)儀器廠）。 </p><p>　　色譜柱：Develosil C30UG5（150mm×4.6mm，5μm，日本Nomura Chemical Co.,Ltd)；流動相為磷酸二氫鉀（其中磷酸二氫鉀溶液25mmol/L，內(nèi)含乙二胺四乙酸二鈉0.5mmol/L，用磷酸調(diào)pH3.4）：乙腈=97：3（體積

8、比），用前經(jīng)0.45μm濾膜真空抽濾，流速1.5mL/min；玻璃碳工作電極，Ag/AgCl參比電極，檢測電位0.6V；柱溫30℃，自動進(jìn)樣器溫度10℃。 </p><p>　　1.4 動物分組與給藥 所有動物隨機(jī)分為3組，每組各12只，即穴位埋線+氯氮平組（簡稱埋線組）、氯氮平組和空白對照組。穴位埋線組和氯氮平組根據(jù)氯氮平的臨床劑量通過體表系數(shù)換算公式［2］計(jì)算出大鼠用藥的等效劑量為20～30mg·

9、;kg-1·d-1。給藥方案如下：氯氮平灌胃由小劑量（5mg·kg-1·d-1）開始，逐漸以5mg·kg-1·d-1為單位增加，每3d增加1次，至劑量為30mg·kg-1·d-1；而后即以1mg·kg-1·d-1為單位遞減，每2d減少1次至用藥劑量為22mg·kg-1·d-1，并維持劑量用藥直至處死動物并取材檢測，整個實(shí)驗(yàn)周期為

10、4個月。 </p><p>　　1.5 穴位埋線干預(yù) 服用氯氮平60d后對埋線組進(jìn)行穴位埋線干預(yù)措施，5d埋線1次，共治療12次，結(jié)束實(shí)驗(yàn)。按文獻(xiàn)［3］選取兩組穴位：①百會、心俞（雙）、曲池（雙）；②大椎、脾俞（雙），足三里（雙）。兩組穴位交替埋線，每5d治療1次。在埋線組每次治療的同時，給予氯氮平組、空白對照組每只大鼠抓取15min的刺激。穴位埋線方法：先將1cm醫(yī)用羊腸線放入2mL注射器的針孔，待穴位局部

11、消毒后繃緊皮膚，將注射器針頭刺入穴位，再用已經(jīng)修剪過的針灸針推入穴位內(nèi)，后按壓針孔止血。 </p><p>　　1.6 樣品采集與指標(biāo)檢測 實(shí)驗(yàn)完畢后斷頭處死，將大鼠的頭在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，立即置于生理鹽水的冰盤上取腦組織，迅速分離大鼠的下丘腦，稱質(zhì)量。將下丘腦置玻璃勻漿器中，加入20g/L三氯乙酸溶液（預(yù)冷至4℃）500μL，制成勻漿，勻漿液用吸管小心轉(zhuǎn)移入離心管中，用200μLNa

12、H2PO4溶液（0.33mol/L，pH6.0，內(nèi)含0.5mmol/LNa2EDTA)蕩洗勻漿器，洗液并入離心管，混旋均勻，低溫高速離心（4℃，12000r/min，15min），取上清液50μL，采用HPLC檢測單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5羥色胺（5HT）、多巴胺（DA）的含量。 </p><p>　　1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)均用SPSS11.0軟件處理，組間差異顯著性采用t檢驗(yàn)和單因素方差分析。組間比較統(tǒng)計(jì)方

13、法為最小顯著差法（LSD）。 </p><p><b>　　2 結(jié)果 </b></p><p>　　2.1 一般情況 治療前氯氮平組、埋線組大鼠活動少，睡眠多，食量減少，毛發(fā)黃、卷曲，對異性不表現(xiàn)出明顯的興奮行為，大便較少，干燥，略帶鐵紅色；空白對照組活動多，睡眠相對少，食量多，毛色白、順滑貼于體表，對異性表現(xiàn)出明顯的興奮行為，大便正常。埋線組治療12次后觀察發(fā)

14、現(xiàn)大鼠活動增多，睡眠相對少，食量增加，毛色白、順滑貼于體表，對異性表現(xiàn)出明顯的興奮行為，大便正常。 </p><p>　　2.2 各組大鼠體質(zhì)量治療前后比較 表1結(jié)果顯示，穴位埋線治療前，埋線組、氯氮平組大鼠體質(zhì)量均顯著性增加（P＜0.05）,表明氯氮平長期使用可使體質(zhì)量增加；而埋線治療可抑制大鼠體質(zhì)量的增加，與氯氮平組比較具有顯著性差異（P＜0.05）。 </p><p>　　2.3

15、 各組大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量比較 </p><p>　　表2結(jié)果顯示，氯氮平長期使用可使下丘腦內(nèi)DA和5HT含量顯著性下降（P＜0.05或P＜0.01），而埋線治療可顯著性升高下丘腦中DA和5HT含量（P＜0.05）。 </p><p><b>　　3 討論 </b></p><p>　　3.1 氯氮平副反應(yīng)與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)

16、 氯氮平（clozapine)是非典型的抗精神病藥，主要是通過其較強(qiáng)的阻滯5HT2受體的性能而起到抗精神病作用。有學(xué)者［4］研究了氯氮平對精神分裂癥患者中樞單胺遞質(zhì)系統(tǒng)的影響，發(fā)現(xiàn)精神分裂癥治療前與治療后相比，DA功能相對亢盛，去甲腎上腺素（NE）功能相對低下，氯氮平可能是通過調(diào)整NEDA系統(tǒng)的功能而發(fā)揮治療作用。 </p><p>　　至于抗精神病藥物致體質(zhì)量增加的藥理學(xué)機(jī)制，有研究認(rèn)為主要是氯氮平具有較強(qiáng)

17、的抑制H1受體的能力有關(guān)，H1受體能引起體質(zhì)量增加［5］；另一個重要機(jī)制是拮抗5HT1A受體引起胰島素分泌減少而發(fā)生高血糖。除了對5HT1A受體作用外，氯氮平還可能通過抑制5HT2c受體引起體質(zhì)量增加［6-8］。因此我們在研究中主要觀察了研究對象的體質(zhì)量和單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化。本研究結(jié)果顯示，服用氯氮平藥物的大鼠體質(zhì)量顯著性升高，而5羥色胺和多巴胺含量顯著性下降，與文獻(xiàn)報道一致。表1 各組大鼠治療前后體質(zhì)量比較表2 各組下丘

18、腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量比較 </p><p>　　3.2 穴位埋線減輕氯氮平副作用的可能機(jī)制 長期服用氯氮平的病人往往表現(xiàn)為肥胖，體態(tài)臃腫，安靜少動，睡眠增多等，中醫(yī)辨證為"痰濕"、"脾虛"、"氣虛"等。治療上宜健脾助運(yùn)、化痰除濕開竅，一般取穴以陽明經(jīng)和督脈的穴位以及能調(diào)節(jié)相應(yīng)內(nèi)臟功能的背俞穴為主。穴位埋線是將可吸收的羊腸線埋入穴位內(nèi)，通過其在吸收的

19、過程中對穴位產(chǎn)生持續(xù)性的刺激作用達(dá)到治療目的，對精神病人來說較安全。因此，本研究采用穴位埋線的方法，通過持續(xù)刺激陽明經(jīng)和督脈的穴位，以調(diào)節(jié)內(nèi)分泌和神經(jīng)系統(tǒng)的功能，從而達(dá)到減輕氯氮平副作用的效果。 </p><p>　　本研究發(fā)現(xiàn)穴位埋線能使氯氮平大鼠體質(zhì)量顯著性降低，還可使中樞內(nèi)的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA和5HT的含量顯著性回升，這可能是穴位埋線拮抗氯氮平副作用的可能機(jī)制之一。 </p><p&g

20、t;　　綜上所述，穴位埋線治療方法在減輕氯氮平副作用方面具有一定療效，而且不影響其抗精神病作用的發(fā)揮。然而本實(shí)驗(yàn)僅測定了下丘腦中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量，未檢測海馬、大腦皮質(zhì)內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量的變化。穴位埋線減輕氯氮平副作用的具體機(jī)制還有待深入研究。 </p><p><b>　　【參考文獻(xiàn)】 </b></p><p>　?。?］曹玉萍．抗精神病藥源性肥胖的機(jī)制與對策［Ｊ］．

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