黃瓜根際對(duì)羥基苯甲酸降解菌的分離鑒定及特性的研究.pdf

1、黃瓜是我國(guó)主要栽培蔬菜之一，溫室栽培的連續(xù)種植方式容易引起連作障礙。對(duì)羥基苯甲酸(p-hydroxybenzonic acid，PHBA)是引起連作障礙的主要自毒物質(zhì)之一。本實(shí)驗(yàn)從連作黃瓜根際土中篩選PHBA降解菌，研究降解菌的生理特性，降解菌對(duì)黃瓜抗氧化酶、土壤酶活性的影響，評(píng)估其對(duì)作物連作的緩解作用。具體研究結(jié)果如下，
　　(1)篩選出對(duì)PHBA降解能力高的3株菌株。結(jié)合生理生化和分子鑒定結(jié)果，放線菌GLY-P1和GLY-P2

2、分別被鑒定為Streptomyces griseoruber和Streptomyces canus，細(xì)菌GLY-P3被鑒定為Ensifer adhaerens。
　　(2)Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2在32℃、pH10、PHBA初始濃度為0.5g/L條件下降解率最高。在偏堿土壤中，Streptomyces griseoruberGLY-P1和St

3、reptomyces canus GLY-P2降解率較高。Ensifer adhaerens GLY-P3最適降解條件為溫度30℃，pH7，PHBA初始濃度為0.5g/L，氮源為硫酸銨，接種量8％(8×109cfu)。在最優(yōu)降解條件下，12h內(nèi)Ensifer adhaerens GLY-P3降解PHBA99.2％。
　　(3)推測(cè)Streptomyces griseoruber GLY-P1、Streptomyces canus

4、GLY-P2和Ensiferadhaerens GLY-P3代謝PHBA途徑可能為原兒茶酸途徑。在32℃、pH7、PHBA初始濃度為0.5g/L條件下，Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2發(fā)酵液中原兒茶酸的最大含量分別為3.2mg/L和3.8mg/L。
　　(4)將菌株Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyce

5、s canus GLY-P2置于PHBA環(huán)境中，體內(nèi)SOD、CAT、DHAR和APX活性發(fā)生明顯改變，菌株Ensifer adhaerens GLY-P3處于PHBA環(huán)境中，體內(nèi)SOD、CAT、DHAR和MDHAR活性發(fā)生明顯改變，說(shuō)明在響應(yīng)PHBA脅迫中，SOD、CAT、DHAR和APX在菌株Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2起主要作用，SOD、CAT、D

6、HAR和MDHAR在菌株Ensiferadhaerens GLY-P3起主要作用。
　　(5)當(dāng)在每克土壤中施加220微克PHBA時(shí)，黃瓜葉片中H2O2、O2·-、MDA含量和SOD、POD、APX、DHAR活性都明顯升高，當(dāng)土壤中施加GLY-P3時(shí)，黃瓜中H2O2、 O2·-、MDA含量和SOD、CAT、POD活性都明顯降低，表明PHBA對(duì)黃瓜造成脅迫作用，GLY-P3緩解了PHBA對(duì)黃瓜的脅迫作用。土壤中PHBA的施加，使黃瓜