低溫保存同種主動脈和肺動脈移植物免疫排斥反應(yīng)研究.pdf

1、為探討同種異體血管移植物對宿主免疫狀態(tài)的影響以及排異反應(yīng)對血管移植物的作用，本研究通過低溫保存的大鼠同種異體帶瓣主動脈和肺動脈異位移植模型的研究，探討低溫保存對同種血管移植物抗原性的影響，觀察同種血管移植后宿主體液和細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化，以及移植物的病理改變。研究免疫抑制劑治療對同種血管移植的作用效果。 方法： 1、采用液氮低溫保存方法長期保存同種主動脈和肺動脈，應(yīng)用透射電鏡觀察低溫保存對同種主動脈和肺動脈內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和組織完

2、整性的影響。 2、制作動物模型，將低溫保存的SD大鼠的主動脈或肺動脈異位植入大鼠的腹主動脈，分組：主動脈移植組、肺動脈移植組、主動脈免疫治療(CsA)組、對照組。在移植后1、2、3、4、5周收集移植動物血清標(biāo)本，同時取出血管移植物。 3、移植物切片常規(guī)HE染色，測定其增厚內(nèi)膜與中層比值及移植物外膜單核細(xì)胞浸潤數(shù)。免疫組化染色測量MHCⅡ陽性表達，淋巴細(xì)胞涂片免疫組化測定CD4+、CD8+百分率。應(yīng)用酶聯(lián)法測定血清中IL—

3、2含量和TNF-α含量。 結(jié)果： 電鏡結(jié)果顯示低溫保存方法能夠保存同種主動脈和肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞的活性和結(jié)構(gòu)的完整性。大鼠同種移植后1周出現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，內(nèi)膜增厚，并逐漸加重。大量炎癥細(xì)胞浸潤移植物外膜和中層，術(shù)后炎癥細(xì)胞浸潤數(shù)長時間維持在很高水平。移植后1—4周可見MHCⅡ顯著陽性，CD4+、CD4+/CD8+比值明顯增高。血清中IL—2和TNF—a含量明顯增高，并在術(shù)后5周內(nèi)維持很高水平，上述結(jié)果與對照組比較均有顯著

4、差異(p<0.05)。CsA治療對移植物內(nèi)膜增厚、淋巴細(xì)胞浸潤、MHCⅡ表達、T淋巴細(xì)胞激活、IL—2和TNF—a含量增高具有明顯的抑制作用(p<0.05)。主動脈與肺動脈同種移植在內(nèi)膜增厚、淋巴細(xì)胞浸潤、MHCⅡ表達、T淋巴細(xì)胞激活、IL—2和TNF—a含量增高方面沒有顯著差異(p>0.05)。 結(jié)論： 一、液氮低溫保存同種異體主動脈和肺動脈能保持其生物活性和組織結(jié)構(gòu)完整性。 一、低溫保存同種異體主動脈和肺動脈