蛋白質(zhì)印跡軟濕凝膠聚合物微球的研究.pdf

1、以蛋白質(zhì)為模板得到的分子印跡聚合物可以用作抗體,酶或天然生物結(jié)構(gòu)的替代物以及細(xì)胞支架材料,在生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)等方面顯示出廣闊的應(yīng)用前景.本工作針對(duì)當(dāng)前蛋白質(zhì)印跡的特點(diǎn)和難點(diǎn),設(shè)計(jì)并制備了蛋白質(zhì)印跡軟濕凝膠聚合物微球(Protein-IPGBs),并研究了Protein-IPGBs的吸附以及識(shí)別性能,考察了影響蛋白質(zhì)印跡軟濕凝膠聚合物吸附及識(shí)別性能的各種因素,并對(duì)其印跡和識(shí)別機(jī)理進(jìn)行了分析. 工作中首先以丙烯酰胺(AM)和N,N'-

2、亞甲基雙丙烯酰胺(BisAM)為聚合物母體材料,以多種蛋白質(zhì)為模板分子,采用反相懸浮聚合法制備了Protein-IPGBs.制備的Protein-IPGBs濕態(tài)時(shí)表面具有宏觀可見(jiàn)且分布均勻的大孔結(jié)構(gòu),這些大孔結(jié)構(gòu)有利于體積龐大的蛋白質(zhì)分子的傳質(zhì).吸附試驗(yàn)結(jié)果表明BSA-IPGBs吸附容量是非印跡微球的4倍多,表明BSA印跡微球具有較高的吸附選擇性和識(shí)別性能.我們認(rèn)為這種特異識(shí)別性能是通過(guò)印跡孔穴與模板蛋白質(zhì)形狀互補(bǔ)及由此產(chǎn)生的多氫鍵結(jié)合

3、實(shí)現(xiàn)的.本文還研究了模板蛋白質(zhì)類型、交聯(lián)度、反應(yīng)溫度、模板加入量對(duì)印跡凝膠微球吸附容量和印跡效率的影響. 工作中進(jìn)一步以高交聯(lián)度的PAM凝膠微球?yàn)榉N子,采用反相種子懸浮聚合法制備了Protein-IPGBs.結(jié)果表明:在加入更少量的模板蛋白質(zhì)的情況下,可以得到與直接包埋法制備的印跡凝膠微球同等的印跡效果；相對(duì)反相懸浮聚合法制備的凝膠微球,所制備的Protein-IPGBs的再生性能有了很大的改善,而且印跡凝膠微球達(dá)到吸附平衡的時(shí)