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文檔簡(jiǎn)介
1、肝臟缺血再灌注是臨床上一種常見(jiàn)的病理生理現(xiàn)象,大多繼發(fā)于肝臟移植或復(fù)雜的肝臟外科手術(shù)中,而對(duì)于該損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究大多集中在嚙齒類小鼠、大鼠肝臟損傷模型上,應(yīng)用小型豬的報(bào)道很少。因此,本實(shí)驗(yàn)試圖應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)建立小型豬肝臟缺血與損傷模型,對(duì)圍術(shù)期生命體征、損傷后肝臟微環(huán)境的變化和再生能力進(jìn)行監(jiān)測(cè)與分析,探索手術(shù)對(duì)小型豬生理功能和肝組織再生能力的影響。為構(gòu)建合適的小型豬肝臟缺血與損傷模型提供科學(xué)依據(jù),亦可為肝臟移植、肝組織再生等科學(xué)研究奠
2、定基礎(chǔ)。
本實(shí)驗(yàn)選取25頭健康巴馬小型豬,隨機(jī)分為A、B、C、D、E5組,各組麻醉方法、氣腹和手術(shù)通路的建立方式相同,而根據(jù)手術(shù)處理方法不同,A組為假手術(shù)組、B組為左半肝切除組、C組為右半肝缺血30min合并左半肝切除組、D組為右半肝缺血60min合并左半肝切除組、E組為右半肝缺血90min合并左半肝切除組。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)重要生理指標(biāo)進(jìn)行全程連續(xù)檢測(cè)。各組分別于術(shù)前、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d、14d、30d采取靜脈血,檢
3、測(cè)血清總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的變化。在術(shù)前、缺血后即刻、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d和術(shù)后1個(gè)月對(duì)各組小型豬進(jìn)行腹腔鏡下肝臟活組織檢查,進(jìn)行HE染色觀察組織病理學(xué)變化,同時(shí)檢測(cè)肝臟組織增殖細(xì)胞核抗原、Toll樣受體、核因子-κB、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6的表達(dá)變化。
通過(guò)實(shí)驗(yàn),各組手術(shù)均順利完成。術(shù)中各組小型豬的生理指標(biāo)都有不同程度的改變,如心率的升高、呼吸末二氧
4、化碳分壓升高、體溫下降等,除右半肝缺血90min合并左半肝切除組內(nèi)個(gè)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理指波動(dòng)范圍大以外,其余各組均未超出正常耐受范圍,并且在術(shù)后很快恢復(fù)到正常。
損傷后小型豬肝臟功能的變化主要表現(xiàn)為,與術(shù)前相比,術(shù)后1d和3d血清AST變化差異極顯著(P<0.01)。經(jīng)過(guò)缺血和切除手術(shù)的動(dòng)物剩余肝臟組織術(shù)后1d肝細(xì)胞變性和炎性浸潤(rùn)嚴(yán)重,術(shù)后7d肝細(xì)胞明顯增生。術(shù)后各組血清中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子呈先升高再降低的趨勢(shì),在術(shù)后1d升至最高后
5、逐漸降低。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子呈先降低后升高的趨勢(shì),在術(shù)后3d和14d變化差異顯著(0.01<P<0.05)。肝細(xì)胞PCNA表達(dá)水平于術(shù)后1d達(dá)到高峰,之后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低。肝臟組織Toll樣受體和NF-κB表達(dá)量在缺血再灌注后早期明顯升高,缺血后即刻和術(shù)后1d明顯升高,差異極顯著(P<0.01),在術(shù)后3d呈降低趨勢(shì),差異顯著(0.01<P<0.05),其他時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。術(shù)后肝組織白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子的表達(dá)呈
6、先升高后降低的趨勢(shì),在術(shù)后1d迅速升高到最高值,術(shù)后3d、術(shù)后7d逐步降低,但白細(xì)胞介素-6的變化幅度較小。
通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出下列結(jié)論:
1.應(yīng)用腹腔鏡手術(shù)技術(shù)成功建立了小型豬肝臟不同缺血時(shí)間合并部分切除損傷模型,各組手術(shù)均順利完成,證明了該實(shí)驗(yàn)方法是可行性。
2.在手術(shù)過(guò)程中對(duì)小型豬呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)等生理指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià),并通過(guò)對(duì)術(shù)后肝臟組織學(xué)和血清學(xué)的檢測(cè)與分析,證明了該實(shí)驗(yàn)方法是安全的。
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