肝臟缺血與損傷對小型豬生理功能和組織再生的影響.pdf

1、肝臟缺血再灌注是臨床上一種常見的病理生理現(xiàn)象，大多繼發(fā)于肝臟移植或復(fù)雜的肝臟外科手術(shù)中，而對于該損傷的動物實驗研究大多集中在嚙齒類小鼠、大鼠肝臟損傷模型上，應(yīng)用小型豬的報道很少。因此，本實驗試圖應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)建立小型豬肝臟缺血與損傷模型，對圍術(shù)期生命體征、損傷后肝臟微環(huán)境的變化和再生能力進(jìn)行監(jiān)測與分析，探索手術(shù)對小型豬生理功能和肝組織再生能力的影響。為構(gòu)建合適的小型豬肝臟缺血與損傷模型提供科學(xué)依據(jù)，亦可為肝臟移植、肝組織再生等科學(xué)研究奠

2、定基礎(chǔ)。
　　本實驗選取25頭健康巴馬小型豬，隨機(jī)分為A、B、C、D、E5組，各組麻醉方法、氣腹和手術(shù)通路的建立方式相同，而根據(jù)手術(shù)處理方法不同，A組為假手術(shù)組、B組為左半肝切除組、C組為右半肝缺血30min合并左半肝切除組、D組為右半肝缺血60min合并左半肝切除組、E組為右半肝缺血90min合并左半肝切除組。在實驗過程中對重要生理指標(biāo)進(jìn)行全程連續(xù)檢測。各組分別于術(shù)前、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d、14d、30d采取靜脈血，檢

3、測血清總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素、肝細(xì)胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子的變化。在術(shù)前、缺血后即刻、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d和術(shù)后1個月對各組小型豬進(jìn)行腹腔鏡下肝臟活組織檢查，進(jìn)行HE染色觀察組織病理學(xué)變化，同時檢測肝臟組織增殖細(xì)胞核抗原、Toll樣受體、核因子-κB、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6的表達(dá)變化。
　　通過實驗，各組手術(shù)均順利完成。術(shù)中各組小型豬的生理指標(biāo)都有不同程度的改變，如心率的升高、呼吸末二氧

4、化碳分壓升高、體溫下降等，除右半肝缺血90min合并左半肝切除組內(nèi)個別實驗動物的生理指波動范圍大以外，其余各組均未超出正常耐受范圍，并且在術(shù)后很快恢復(fù)到正常。
　　損傷后小型豬肝臟功能的變化主要表現(xiàn)為，與術(shù)前相比，術(shù)后1d和3d血清AST變化差異極顯著(P＜0.01)。經(jīng)過缺血和切除手術(shù)的動物剩余肝臟組織術(shù)后1d肝細(xì)胞變性和炎性浸潤嚴(yán)重，術(shù)后7d肝細(xì)胞明顯增生。術(shù)后各組血清中肝細(xì)胞生長因子呈先升高再降低的趨勢，在術(shù)后1d升至最高后

5、逐漸降低。轉(zhuǎn)化生長因子呈先降低后升高的趨勢，在術(shù)后3d和14d變化差異顯著(0.01＜P＜0.05)。肝細(xì)胞PCNA表達(dá)水平于術(shù)后1d達(dá)到高峰，之后隨著時間的延長逐漸降低。肝臟組織Toll樣受體和NF-κB表達(dá)量在缺血再灌注后早期明顯升高，缺血后即刻和術(shù)后1d明顯升高，差異極顯著(P＜0.01)，在術(shù)后3d呈降低趨勢，差異顯著(0.01＜P＜0.05)，其他時間點差異不顯著(P＞0.05)。術(shù)后肝組織白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子的表達(dá)呈

6、先升高后降低的趨勢，在術(shù)后1d迅速升高到最高值，術(shù)后3d、術(shù)后7d逐步降低，但白細(xì)胞介素-6的變化幅度較小。
　　通過實驗結(jié)果得出下列結(jié)論:
　　1.應(yīng)用腹腔鏡手術(shù)技術(shù)成功建立了小型豬肝臟不同缺血時間合并部分切除損傷模型，各組手術(shù)均順利完成，證明了該實驗方法是可行性。
　　2.在手術(shù)過程中對小型豬呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)等生理指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測和評價，并通過對術(shù)后肝臟組織學(xué)和血清學(xué)的檢測與分析，證明了該實驗方法是安全的。