糖化終末產(chǎn)物受體基因-374T-A、-429T-C基因多態(tài)性與2型糖尿病動(dòng)脈硬化的關(guān)系.pdf

1、目的:(1)探討糖化終末產(chǎn)物受體(the receptor for advanced glycation end-products,RAGE)基因-374T/A、-429T/C基因多態(tài)性與2型糖尿病(T2DM)的關(guān)系。(2)探討RAGE基因-374T/A、-429T/C基因多態(tài)性與T2DM動(dòng)脈硬化(artherosclerosis,AS)的關(guān)系。(3)探討血清內(nèi)源分泌型糖化終末產(chǎn)物受體(endogenous secretory RAGE

2、,esRAGE)水平與T2DM動(dòng)脈硬化的關(guān)系。(4)分析RAGE基因-374T/A、-429T/C基因多態(tài)性與esRAGE水平以及炎癥因子是否相關(guān)。
　　方法:選取符合1999年世界衛(wèi)生組織(WHO)2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)的290名T2DM患者,同時(shí)入組83名非糖尿病無(wú)親緣關(guān)系的健康人作為對(duì)照組(NC)。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(polymerase chain reaction--restricted frag

3、ment length polymorphisms,PCR-RFLP)技術(shù)進(jìn)行RAGE基因啟動(dòng)區(qū)-429T/C和-374T/A多態(tài)基因型檢測(cè)。采用彩色多普勒超聲測(cè)定頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(carotidintima-mediathickness,cIMT),以cIMT作為評(píng)價(jià)動(dòng)脈硬化指標(biāo),根據(jù)cIMT將患者分為T2DM動(dòng)脈硬化組(cIMT≥0.9mm)和T2DM非動(dòng)脈硬化組(cIMT<0.9mm)。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清e(cuò)

4、sRAGE水平和炎癥因子腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)及白介素6(interleukin 6,IL-6)。血糖采用葡萄糖過(guò)氧化酶法測(cè)定。糖化血紅蛋白采用高效液相頻譜法測(cè)定。血脂譜和肝腎功能采用自動(dòng)生化儀測(cè)定。統(tǒng)計(jì)學(xué)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量變量以x±s表示,正態(tài)分布的連續(xù)變量?jī)山M間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),兩組相關(guān)分析采用皮爾遜相關(guān)分析。非正態(tài)分布的連續(xù)變量?jī)山M間比較用Mann

5、-whitney U檢驗(yàn),兩組相關(guān)分析采用Spearman’s相關(guān)分析。等位基因的頻率分布和基因型頻率分布在不同分組之間的比較采用卡方檢驗(yàn)。應(yīng)用二元logistic回歸分析分析RAGE基因-429T/C及-374T/A基因型與臨床生化指標(biāo)的關(guān)系。2型糖尿病組cIMT與臨床資料、esRAGE、TNF-α、IL6相關(guān)性用逐步多元線性回歸分析,非正態(tài)分布變量先通過(guò)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為正態(tài)分布后進(jìn)行方程分析。所有的結(jié)果以P<0.05為有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6、
　　結(jié)果:(1)T2DM組與對(duì)照組的一般臨床參數(shù)相比較,收縮壓(systolic blood pressure,SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure,DBP)、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、甘油三酯(triglycerides,TG)及低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)

7、升高,差別具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)降低,亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而性別、年齡、吸煙、體重指數(shù)(bodymassindex,BMI)及總膽固醇(totalcholesterol,CHO)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。T2DM組中動(dòng)脈硬化組和無(wú)動(dòng)脈硬化組比較,cIMT分別為1.16±0.41mmvs0.67±0.1

8、0mm,P<0.01;兩組之間性別、年齡、吸煙、病程、具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);BMI及LDL-C亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而SBP、DBP、FBG、HbA1c、TG、CHO、HDL-C在兩組之間的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)T2DM組與對(duì)照組的血清e(cuò)sRAGE水平?jīng)]有明顯差別(0.2817±0.1588ug/lvs0.2925±0.1178ug/l,P>0.05)。而T2DM中AS組血清e(cuò)sRAGE水平低

9、于無(wú)AS組(0.2712±0.1898ug/lvs0.2974±0.2230ug/l,P=0.035)。(3)T2DM組血清TNF-α和IL6水平均高于正常對(duì)照組,分別為75.5701±51.9540pg/mlvs33.9261±27.1512pg/ml,P=0.048和10.9737±6.2281pg/mlvs7.4037±3.7211pg/ml,P=0.049。同時(shí)T2DM中AS組血清TNF-α和IL6水平均高于無(wú)AS組,分別為99

10、.1049±82.6261pg/mlvs51.7379±45.1253pg/ml,P=0.027和10.5968±6.9426pg/mlvs7.5240±3.2370pg/ml,P=0.026。(4)正常對(duì)照組、T2DM的AS組及無(wú)AS組中,各組基因型頻率分布均符合Hardy-Weinberg平衡。T2DM組中RAGE基因-429位點(diǎn)攜帶C等位基因的基因型(TC+CC)頻率明顯高于正常對(duì)照組(X2=9.056,P=0.003),C等位基

11、因頻率明顯高于正常對(duì)照組(X2=8.044,P=0.005)。而T2DM中AS組與無(wú)AS組間-429T/C多態(tài)基因型(TT、TC、CC)頻率和等位基因(T、C)頻率分布差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=8.412,P=0.059)。(5)無(wú)論T2DM組與正常對(duì)照組還是T2DM中AS組與無(wú)AS組比較,RAGE基因-374T/A多態(tài)的基因型(TT、TA、AA)頻率和等位基因(T、A)頻率分布差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P>0.05)。(6)T2DM組cIMT

12、與各臨床參數(shù)、esRAGE、TNF-α、IL6多元線性回歸分析提示:cIMT與年齡、吸煙、收縮壓呈顯著正相關(guān)(P<0.01),與esRAGE負(fù)相關(guān)(r=-0.271,P<0.01),與HDL-C負(fù)相關(guān)(r=-0.136,P<0.05),cIMT與炎癥因子TNF-α、IL6無(wú)相關(guān)性。(7)無(wú)論是正常對(duì)照組或T2DM組,esRAGE與TNF-α、IL6均無(wú)相關(guān)性。(8)應(yīng)用二元logistic回歸分析模型分析,正常對(duì)照組RAGE基因-429

13、基因型與年齡呈正相關(guān)(r=0.517,P<0.05),與其它的臨床參數(shù)、esRAGE及TNF-ɑ、IL6無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。2型糖尿病組RAGE基因-429基因型與BMI、TNF-ɑ呈正相關(guān)(P<0.05),與其它的臨床參數(shù)、esRAGE及IL6無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。正常對(duì)照組RAGE基因-374基因型與TNF-ɑ、IL-6呈正相關(guān)(P<0.05),與其它的臨床參數(shù)、esRAGE無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。2型糖尿病組RAGE基

14、因-374基因型與HbA1c呈負(fù)相關(guān)(r=-0.155,P<0.05)。與其它的臨床參數(shù)、esRAGE及IL6無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。
　　結(jié)論:(1)RAGE基因啟動(dòng)區(qū)-429T/C多態(tài)性與2型糖尿病發(fā)生相關(guān),C等位基因可能為中國(guó)人2型糖尿病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。(2)RAGE基因-374T/A和-429T/C多態(tài)性均與中國(guó)人群2型糖尿病動(dòng)脈硬化無(wú)相關(guān)性。(3)2型糖尿病組RAGE基因-429T/C多態(tài)性與TNF-ɑ呈正相關(guān),與血清