水通道蛋白9在人肝癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景：
　　 肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，以其高發(fā)病率和高度惡性行為著稱，占我國癌癥死亡率的第二位。隨著肝臟影像學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，肝切除技術(shù)的發(fā)展及圍手術(shù)期管理知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)的不斷積累，肝細(xì)胞癌患者的治療效果較前有了顯著提高，但是患者的總體預(yù)后仍不令人滿意，肝癌術(shù)后5年累計(jì)復(fù)發(fā)率可高達(dá)35％-75％。究其原因，與肝癌惡性程度高，一般情況下癌灶周圍血供豐富，腫瘤進(jìn)展快，

2、早期易發(fā)生腫瘤細(xì)胞的肝內(nèi)和/或肝外微轉(zhuǎn)移，或者出現(xiàn)肝臟門脈的癌栓，加之手術(shù)有時(shí)不能徹底切凈癌灶，手術(shù)過程中還有可能造成醫(yī)源性的肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移，術(shù)后對(duì)化療藥物不甚敏感有關(guān)。因此，要想更好更徹底的治療肝細(xì)胞癌，必須全方面多時(shí)段的了解掌握肝細(xì)胞癌進(jìn)程，尋找突破口。
　　 腫瘤分子細(xì)胞生物學(xué)是近年來新興的一門學(xué)科，它通過各種現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，在基因和分子的水平上研究腫瘤的發(fā)生機(jī)理，揭示腫瘤細(xì)胞在基因組DNA的突變、表觀遺傳學(xué)方面變化引起

3、的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)異常、以及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方面發(fā)生的紊亂，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞在以上方面和正常細(xì)胞的區(qū)別，并最終將這些知識(shí)用于腫瘤的診斷、治療和新型抗腫瘤藥物的設(shè)計(jì)和研發(fā)，達(dá)到最大程度地早期診斷腫瘤和最終治愈腫瘤的目的。近年來，腫瘤分子生物學(xué)推斷水通道蛋白(aquaporin，AQP)將可能是針對(duì)腫瘤細(xì)胞生存、侵襲和轉(zhuǎn)移的一種新的作用靶點(diǎn)。
　　 目前研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白(aquaporin，AQP)是一種廣泛存在于細(xì)胞膜上的水通透性蛋白，在哺

4、乳動(dòng)物各種組織細(xì)胞中有著廣泛的分布，已知的在哺乳類共發(fā)現(xiàn)有13個(gè)成員（命名為AQP0～12），其中AQP9具有獨(dú)特的轉(zhuǎn)運(yùn)活性，除了對(duì)水有轉(zhuǎn)運(yùn)活性外，還對(duì)其他多種非帶電的中性物質(zhì)，如脲、多羥基化合物、嘌呤、嘧啶、尿素等具有通透性，包括對(duì)常用的抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶具有轉(zhuǎn)運(yùn)活性。因此本實(shí)驗(yàn)研究以肝細(xì)胞癌為研究對(duì)象，應(yīng)用免疫組織化學(xué)和蛋白免疫印跡方法研究水通道蛋白9(AQP9)在人肝細(xì)胞癌組織和正常肝組織中的表達(dá)差異，旨在初步探討表達(dá)差異的意

5、義。
　　 方法：
　　 1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)(IHC)技術(shù)檢測AQP9在肝細(xì)胞癌組織和非肝細(xì)胞癌組織中的分布及表達(dá)情況
　　 實(shí)驗(yàn)分為肝細(xì)胞癌組織組(n＝42)和非肝細(xì)胞癌組織組(n＝42)，分別切取石蠟切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測兩組組織中AQP9的表達(dá)與分布；
　　 2.應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western Blot，WB)試驗(yàn)方法半定量的檢測AQP9在肝細(xì)胞癌組織和正常肝組織中的表達(dá)情況；
　

6、　 3.統(tǒng)計(jì)所有42例肝細(xì)胞癌患者臨床資料，追蹤患者術(shù)后病檢結(jié)果；
　　 4.用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，以確定AQP9在兩組之間表達(dá)是否具有差異，是否與患者臨床病理參數(shù)有關(guān)聯(lián)。
　　 結(jié)果：
　　 1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法可以檢測出AQP9在兩組組織中的表達(dá)；
　　 2.應(yīng)用蛋白免疫印跡法可以半定量的檢測AQP9在兩組組織中的表達(dá)；
　　 3.AQP9在非癌組織中的高表達(dá)率為73.81％(31/42

7、)，在癌組織中高表達(dá)率為40.48％(17/42)，AQP9在非肝癌組織和肝癌組織中表達(dá)情況存在顯著性差異(P＜0.01)；
　　 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，Ⅰ-Ⅱ級(jí)分化肝癌組織和Ⅲ-Ⅳ分化肝癌組織之間AQP9表達(dá)水平之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.在肝細(xì)胞癌組織和非肝細(xì)胞癌組織中均能檢測到AQP9的表達(dá)；
　　 2.AQP9在非肝癌組織的表達(dá)要高于其在肝癌組織中表達(dá)；
　　 3.AQP9在