2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察鞘內(nèi)注射甲氨蝶呤對(duì)脛骨癌痛大鼠機(jī)械痛敏的影響,并觀察其對(duì)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞的活化以及促炎性細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)分泌的影響,初步探討其可能的脊髓機(jī)制。
  方法:實(shí)驗(yàn)分兩部分完成,第一部分實(shí)驗(yàn):將48只雌性SD大鼠隨機(jī)均分為6組(n=8):假手術(shù)+人工腦脊液組(SA組),假手術(shù)+甲氨蝶呤200μg組(SM組)骨癌痛+人工腦脊液組(CA組),骨癌痛+甲氨蝶呤50μg組(CM50組

2、),骨癌痛+甲氨蝶呤100μg組(CM100組),骨癌痛+甲氨蝶呤200μg組(CM200組)。模型組脛骨骨髓腔內(nèi)注射Walker256乳腺癌細(xì)胞,假手術(shù)組脛骨骨髓腔內(nèi)注射等體積生理鹽水,各組于造模前,造模后1、3、5、7d測(cè)定機(jī)械性縮足閾值(MWT),第7天測(cè)定MWT后鞘內(nèi)注射相應(yīng)劑量甲氨蝶呤或等體積人工腦脊液,并于給藥后2、4、8、24h與給藥后2、3、5、7d測(cè)定MWT,最后處死大鼠留取手術(shù)側(cè)脛骨,HE染色觀察脛骨內(nèi)腫瘤細(xì)胞生長情

3、況。第二部分實(shí)驗(yàn):將30只雌性SD大鼠隨機(jī)均分為3組(n=10):假手術(shù)+人工腦脊液組(SA11組),骨癌痛+人工腦脊液組(CA11組),骨癌痛+甲氨蝶呤100μg組(CM11組)。各組于造模前,造模后1、3、5、7d測(cè)定機(jī)械性縮足閾值(MWT),第7天測(cè)定MWT后鞘內(nèi)注射甲氨蝶呤100μg或等體積人工腦脊液,并于給藥后2、4、8、24h測(cè)定MWT;隨后分別行灌注取材和新鮮取材,免疫熒光觀察脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞的活化情況,Elisa檢測(cè)脊髓T

4、NF-α和IL-1β含量的變化。
  結(jié)果:(1)機(jī)械痛行為學(xué):脛骨骨髓腔內(nèi)注射同源乳腺癌細(xì)胞后大鼠MWT逐漸降低,至造模后7d時(shí)較術(shù)前明顯減低(P<0.05);鞘內(nèi)注射甲氨蝶呤后MWT逐漸增加,其中CM100組與CM200組在給藥后4h較給藥前增加(P<0.05),至24h時(shí)達(dá)最大效應(yīng)(P<0.05),持續(xù)至給藥后5d時(shí)恢復(fù)到給藥前水平(P>0.05),但仍高于CA組(P<0.05)。(2)脛骨組織學(xué):CA組與CM200組組織學(xué)

5、檢測(cè)發(fā)現(xiàn)脛骨髓腔內(nèi)充滿了腫瘤細(xì)胞,骨結(jié)構(gòu)改變明顯,而SA組未見骨結(jié)構(gòu)改變。(3)免疫熒光染色:CA11組Iba-1染色的小膠質(zhì)細(xì)胞幾乎遍布整個(gè)脊髓背角灰質(zhì),胞體肥大,染色加深,小膠質(zhì)細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示CA11組較SA11組明顯增加(P<0.05),而鞘內(nèi)注射甲氨蝶呤后CM11組脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞計(jì)數(shù)較CA11組明顯減少(P<0.05)。(4)Elisa:脊髓TNF-α和IL-1β的表達(dá)量在CA11組顯著增高(與SA11組比較,(P<0.05)

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