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1、目的:采用病例對(duì)照的方法研究外周循環(huán)中內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)和基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α)水平對(duì)急性腦梗死發(fā)生、發(fā)展的影響,探討其相互之間的關(guān)系,為缺血性腦卒中嚴(yán)重程度的評(píng)估及預(yù)后的預(yù)測(cè)提供參考。
方法:⑴實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用病例-對(duì)照研究,選擇2011年8月~2012年4月在廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的患者及同期門(mén)診健康體檢者共163例為對(duì)象,分成3組:卒中組(95例)、對(duì)照組(28例)、高危組(40例)。⑵頸動(dòng)脈彩
2、色超聲檢測(cè)受試者頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(IMT)、粥樣斑塊的形態(tài)學(xué)和頸動(dòng)脈狹窄程度。⑶將卒中患者按改良TOAST標(biāo)準(zhǔn)[1]進(jìn)行病因分型,分為動(dòng)脈粥樣硬化血栓形成(AT)、小動(dòng)脈病變(SAD)、心源性栓塞(CE)和不明原因卒中(SUD)4亞型。⑷NIHSS評(píng)分評(píng)估患者在卒中急性期神經(jīng)功能損傷程度;改良Rankin量表(mRS)評(píng)估卒中恢復(fù)期神經(jīng)功能修復(fù)情況。⑸根據(jù)Pullicino公式[2]:病灶體積=最大長(zhǎng)徑×寬徑×MRI掃描陽(yáng)性層數(shù)×層厚×
3、Π/6,計(jì)算腦梗死的體積。⑹祖細(xì)胞免疫熒光抗體CD34-FITC及CD133-PE標(biāo)記EPCs,采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)循環(huán)EPCs水平。⑺酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定血漿SDF-1α濃度。⑻針對(duì)腦梗死患者,分別檢測(cè)卒中起病時(shí)(72h內(nèi))和第7d兩個(gè)時(shí)間段外周血EPCs及SDF-1α的水平,其變化率定義為(d7-donset)與donset比值。
結(jié)果:①卒中組急性期、對(duì)照組、高危組循環(huán)EPCs水平(%)分別為
4、0.400±0.329、0.698±0.248和0.279±0.101,3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。進(jìn)一步兩兩比較,對(duì)照組EPCs較卒中組和高危組均升高,而卒中組又高于高危組,均呈顯著性差異(P<0.05)。②Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示,循環(huán)EPCs水平與頸動(dòng)脈IMT值呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。③卒中急性期,4個(gè)卒中亞型(動(dòng)脈粥樣硬化血栓形成、心源性栓塞、小動(dòng)脈病變與不明原因卒中)的患者循環(huán)EPCs水平比較,存在差異,
5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中,動(dòng)脈粥樣硬化血栓形成型顯著低于其它3個(gè)亞型(P<0.05)。④根據(jù)入院NIHSS評(píng)分≥7或<7將卒中患者劃分成2組,單變量分析顯示:NIHSS評(píng)分≥7組的循環(huán)EPCs水平(%)顯著低于NIHSS評(píng)分<7組(0.254±0.239VS0.522±0.345,P<0.01);進(jìn)一步Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示,卒中患者急性期循環(huán)EPCs水平與入院NIHSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.512,P<0.01)
6、。⑤卒中21d對(duì)患者進(jìn)行mRS評(píng)分,mRS≤2分患者發(fā)病時(shí)的循環(huán)EPCs水平(%)與mRS>3分患者無(wú)差異(0.452±0.388 VS0.348±0.248,P>0.05),而第7d的循環(huán)EPCs水平(%)mRS≤2分患者顯著高于mRS>3分患者(0.829±0.425VS0.636±0.266,P<0.05)。⑥多元線形回歸分析顯示:卒中后1周的循環(huán)EPCs水平及EPCs變化率均與mRS評(píng)分顯著相關(guān)(P<0.05),其中,EPCs變
7、化率是mRS評(píng)分的主要影響因子(Beta=-0.433)。⑦卒中起病時(shí)及第7d,循環(huán)EPCs水平(%)分別為0.400±0.329、0.734±0.367,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);血漿SDF-1α濃度(ng/mL)分別為1.749±0.814、3.315±1.366,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。經(jīng)Spearman檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),EPCs及SDF-1α變化率呈正相關(guān)(r=0.695,P<0.01)。
8.Spear
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