蝎毒對鋰-匹羅卡品癲癇大鼠抗癇作用及其整合素α2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　 (1)比較性研究蝎毒與丙戊酸在鋰-匹羅卡品癲癇大鼠慢性模型的抗癲癇作用；
　　 (2)研究整合素α2(imegrinα2,ITGA2)在鋰-匹羅卡品癲癇大鼠海馬表達(dá)的動態(tài)變化,了解蝎毒對其影響,探索ITGA2在蝎毒抗癲癇中的作用。
　　 方法:
　　 (1)106只清潔級健康成年雄性SD大鼠,100只用于制作鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型,6只作為正常對照組(n=6)。造模后大鼠隨機(jī)分為模型組(n

2、=40)、丙戊酸組(n=20)、蝎毒組(n=40)。各組均采用灌胃給予干預(yù)藥物,正常對照組、模型組給予蒸餾水,丙戊酸組給予丙戊酸(120mg·kg-1·d-1),蝎毒組給予蝎毒(0.3mg·kg-1·d-1)；
　　 (2)造模后的各組大鼠隨機(jī)選取20只干預(yù)28天并觀察其行為學(xué)表現(xiàn),記錄14d～28d癇性發(fā)作次數(shù)、發(fā)作級別,采用秩和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計；
　　 (3)模型組和蝎毒組剩余各20只根據(jù)干預(yù)天數(shù)隨機(jī)分為1d,3d,7d

3、,14d,28d五個亞組(n=4),采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測ITGA2在各亞組及正常對照組大鼠海馬CA1、CA3、齒狀回(DentateGyrus,DG)區(qū)的表達(dá),通過圖像分析技術(shù)定量分析其動態(tài)變化和組間差異,使用方差分析作為統(tǒng)計方法。
　　 結(jié)果:
　　 (1)各組大鼠行為學(xué)觀察結(jié)果
　　 ①觀察期內(nèi)正常對照組大鼠無癇性發(fā)作；
　　 ②模型組急性期均有Ⅳ級以上發(fā)作,隨后進(jìn)入靜默期(8d～14d)和慢性自

4、發(fā)性發(fā)作期(15d～),表現(xiàn)為自發(fā)性癇性發(fā)作(spontaneous recurrent seizures,SRSs)；
　　 ③與模型組比較,在觀察期內(nèi),丙戊酸組、蝎毒組SRSs累計次數(shù)顯著減少,發(fā)作級別降低,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；
　　 ④與丙戊酸組比較,蝎毒組發(fā)作次數(shù)減少,發(fā)作級別降低,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；
　　 (2)正常對照組和模型組、蝎毒組大鼠海馬ITGA2表達(dá)的觀察
　　

5、 ①ITGA2在各組大鼠海馬CA1、CA3區(qū)錐體細(xì)胞層及DG區(qū)顆粒細(xì)胞層均有表達(dá),各區(qū)均可見ITGA2-IR陽性細(xì)胞,其表達(dá)多分布胞膜,少數(shù)位于胞漿；
　　 ②正常對照組大鼠海馬各區(qū)ITGA2呈弱表達(dá)；
　　 ③模型組大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)在1d時開始上調(diào),14d時至峰值,此后逐漸降低,與正常對照組相比,各時間點模型組大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)明顯增強,除1d時CA1、DG區(qū)外,其余各時間點各區(qū)差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義

6、(P<0.05)；
　　 ④蝎毒組大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)在1d時開始上調(diào),于14d達(dá)峰值,但峰值顯著低于模型組(P<0.05),此后下降,在28d未能恢復(fù)到正常水平(P<0.05),但明顯弱于模型組(P<0.05)；
　　 ⑤與正常對照組相比,各時間點蝎毒組大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)上調(diào),除1d外,各時間點各區(qū)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與模型組比較,除1d時DG區(qū)和3d時CA1區(qū)外,蝎毒組大鼠海馬ITGA2

7、表達(dá)減弱,但僅7d時CA3區(qū),14d時CA1、CA3、DG區(qū),28d時CA1、DG區(qū)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)蝎毒對鋰-匹羅卡品癲癇大鼠慢性模型癇性發(fā)作有顯著的控制效果,可顯著降低發(fā)作級別,減少發(fā)作次數(shù)；
　　 (2)蝎毒在降低鋰-匹羅卡品癲癇大鼠慢性模型的發(fā)作級別與減少發(fā)作次數(shù)上均弱于丙戊酸,推測與蝎毒本身抗癲癇療效、使用劑量和給藥途徑可能有關(guān)；
　　 (3)各治療組

8、中,未見明顯的毒副反應(yīng),無死亡,提示本試驗劑量和給藥途徑下,蝎毒及丙戊酸治療均安全性較好；
　　 (4)鋰-匹羅卡品癲癇模型大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)較正常對照組明顯增強,在1d時開始上調(diào),達(dá)峰值在14d,此后逐漸降低,至28d仍未能恢復(fù)至正常水平；
　　 (5)蝎毒組大鼠海馬各區(qū)ITGA2表達(dá)較正常對照組增強,在1d時開始上調(diào),仍在14d時達(dá)峰值,但峰值顯著低于模型組,此后緩慢下降,28d時未恢復(fù)至正常,但明顯弱于模型