2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]
  近年來,國內(nèi)外對中藥柴胡及其主要有效成分所引起的肝損傷報道日益增多。其導(dǎo)致肝臟毒性的機制尚不明確,為此,本課題以中藥柴胡中主要活性成分柴胡皂苷D(SSD)為代表,利用分子生物學技術(shù)探究其致肝細胞線粒體損傷作為中藥誘發(fā)肝毒性的分子機理,可以為防治中藥肝毒性提供潛在的干預(yù)分子靶點,具有理論與現(xiàn)實意義。
  [研究方法]
  本課題采用LO2肝細胞系進行體外實驗研究,以及小鼠灌胃SSD,應(yīng)用MTS、HE染色、T

2、UNEL染色、LDH檢測、Hoechst染色、流式細胞技術(shù)、免疫熒光、Western blotting、干擾RNA等實驗技術(shù)進行檢測。觀察:1)SSD小鼠灌胃后誘導(dǎo)肝損傷的作用。2)SSD體外作用LO2細胞后對對細胞線粒體的損傷作用以及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax、caspase-3/c-caspase-3、caspase-8/c-caspase-8、c-caspase-9等的表達變化情況。3)SSD對PDGF-βR/p38 MAPK

3、信號通路的影響,以及SSD在阻斷PDGF-βR/p38信號通路后與下游凋亡通路之間的關(guān)系。4)SSD對fas介導(dǎo)的外源性凋亡信號通路的影響。
  [結(jié)果]
  實驗證明SSD灌胃300mg/kg劑量能在小鼠體內(nèi)誘發(fā)明顯的肝臟損傷,促進肝細胞凋亡,同時SSD在體外能造成LO2細胞線粒體的損傷,抑制細胞Bcl-2的表達,而促進Bax和Caspase3/8/9的活化,Cytochrome C釋放增加,且呈劑量依賴性關(guān)系。進一步研究

4、證明SSD通過抑制PDGF-βR/p38 MAPK信號通路誘導(dǎo)細胞凋亡過程。除此之外SSD明顯影響細胞上fas和bid的表達,使fas表達增高而bid表達降低,表明SSD同樣激活fas外源性凋亡通路,并促使其將凋亡信號傳遞至線粒體。
  [結(jié)論]
  SSD通過抑制肝細胞中的PDGF-βR/p38 MAPK信號通路,造成線粒體損傷誘發(fā)下游凋亡通路的激活,進而誘導(dǎo)LO2的凋亡產(chǎn)生;同時SSD能激活細胞膜上的fas受體,使cas

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