CD31與CD34在肺腺癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的;
　　探討CD31與CD34在不同分化程度的肺腺癌中的表達(dá)情況，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系，以及肺癌旁微血管密度的情況。
　　方法:
　　一、材料
　　收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院肺腺癌切除手術(shù)病人石蠟組織標(biāo)本，術(shù)前均未接受放療或化療，共90例。其中高分化:28例，中分化:34例，低分化:28例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移44例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:46例。
　　二、試劑
　　即用型CD31、CD34單克隆抗體（北

2、京中杉金橋公司）、即用型DAB顯色液（北京中杉金橋公司），PBS（磷酸鹽緩沖液），DAB（3，3-二氨基苯聯(lián)胺），二甲苯，梯度酒精，3％雙氧水，5％牛血清蛋白，鏈霉素抗生素—過氧化物酶溶液，生物素標(biāo)記的第二抗體等。
　　三.免疫組化檢測
　　采用免疫組化SABC法分別檢測CD31與CD34在肺腺癌高分化、中分化、低分化的表達(dá)情況，用生物素標(biāo)記的第二抗體作為陰性對照。
　　四、結(jié)果判定
　　應(yīng)用顯微照相系統(tǒng)進(jìn)行圖像

3、采集，CD31與CD34陽性反應(yīng)物為淺棕至深棕色顆粒，分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞。微血管計(jì)數(shù)方法，根據(jù)Weidner方法，首先在低倍鏡下(×5)掃描，尋找腫瘤內(nèi)清楚的血管染色，且微血管密度最多的區(qū)域，然后在200倍物鏡下計(jì)數(shù)腫瘤內(nèi)、腫瘤與正常組織交界處的毛細(xì)血管和小靜脈數(shù)目，任何呈棕黃色的陽性內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇且與鄰近血管、腫瘤細(xì)胞和其它結(jié)締組織成份清楚分開即為一個(gè)能夠計(jì)數(shù)的微血管，因?yàn)橛?jì)數(shù)微血管的方法在觀察者之間或觀察者本人存在著差異，所以

4、在不同的時(shí)間計(jì)數(shù)三次，選擇兩次相同或相近數(shù)目的平均數(shù)。
　　五、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　采用SPSSI6.0軟件對數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用檢驗(yàn)進(jìn)行分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　CD34與CD31抗體顯示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的血管數(shù)分別是25.6±3.8和21.3±3.2，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的血管數(shù)分別是22.2±3.3和19.1±3.5。CD34比CD31更敏感，能突出顯示較小的、不成熟的微血管或單一的內(nèi)皮細(xì)胞，

5、并且有轉(zhuǎn)移肺腺癌的微血管數(shù)顯著高于無轉(zhuǎn)移肺腺癌的微血管數(shù)(P＜0.05)。
　　CD34與CD31在高分化肺腺癌中分別是32.2±12.5和23.6±12.2;在中分化肺腺癌中分別是34.7±7.7和28.2±9.6;在低分化肺腺癌中分別是42.2±15.5和33.4±13.7。由此可看出隨者分化程度的降低，CD31與CD34所標(biāo)記的微血管密度是升高的，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、CD34，CD