綠茶影響血脂代謝的薈萃分析及LIPA基因變異與冠心病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、第一部分，綠茶及其提取物降血脂療效的薈萃分析
　　 研究背景：
　　 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┤匀皇峭{人類健康的重要疾病。血中總膽固醇和低密度脂蛋白(LDL)膽固醇濃度的升高，己被確認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化及其所致冠心病發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素。既往研究顯示血清膽固醇水平每下降10％，未來發(fā)生心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)就會(huì)降低30%。健康的生活方式，如良好的飲食習(xí)慣可預(yù)防高脂血癥的發(fā)生。綠茶是我國傳統(tǒng)飲品，富含茶多酚等有機(jī)物和礦物質(zhì)

2、，其中茶多酚單體表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechingallate，EGCG)是綠茶中最具活性的分子。近年的流行病學(xué)研究提示，綠茶具有心血管保護(hù)作用，飲用綠茶與心血管疾病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)。大量的基礎(chǔ)研究證實(shí)，茶多酚可通過抑制腸道內(nèi)外源性膽固醇的吸收、提高卵磷酸脂膽固醇脂?；D(zhuǎn)移酶活性和高密度脂蛋白膽固醇水平、調(diào)節(jié)載脂蛋白和脂蛋白水平、加速膽固醇代謝及促進(jìn)膽固醇的排泄等機(jī)制調(diào)節(jié)血清中總膽固醇和LDL膽固醇的含量。既往有關(guān)

3、綠茶對血脂影響的臨床隨機(jī)對照試驗(yàn)（randomizedcontrolledtrial，RCT）也提示飲用綠茶或口服補(bǔ)充茶多酚可影響成人空腹血脂水平，但這些臨床試驗(yàn)大多樣本量較小，結(jié)論并不一致。有臨床試驗(yàn)證實(shí)飲用綠茶或口服綠茶提取物能顯著降低血清總膽固醇(totalcholesterol，TC)和低密度脂蛋白（low-densitylipoprotein，LDL）膽固醇水平，同時(shí)能顯著升高血清高密度脂蛋白(high-densitylipo

4、protein，HDL)膽固醇水平。與此同時(shí)，還有其他臨床干預(yù)試驗(yàn)顯示攝入綠茶或其提取物對血脂水平無顯著性影響?？傊G茶或綠茶提取物是否可改善血脂代謝仍然存在爭議。
　　 研究目的：
　　 對成年人攝入綠茶或綠茶提取物改善血清TC、LDL膽固醇、HDL膽固醇水平的效果進(jìn)行一項(xiàng)臨床薈萃分析，探討其內(nèi)在的影響因素，為倡導(dǎo)健康生活方式、降低高脂血癥的發(fā)生提供理論依據(jù)。
　　 研究方法：
　　 通過系統(tǒng)檢索Pu

5、bMed、Cochranelibrary、Embase電子數(shù)據(jù)庫，入選2011年3月以前在公開刊物上發(fā)表的隨機(jī)對照臨床試驗(yàn)為薈萃分析的來源。以應(yīng)用綠茶及綠茶提取物后成人血清TC、LDL膽固醇或HDL膽固醇由基礎(chǔ)到終點(diǎn)的變化值為標(biāo)志，采用固定效應(yīng)模型（fixed-effectmodels）或隨機(jī)效應(yīng)模型（random-effectmodels），以加權(quán)平均差（weightedmeandifference，WMD）及其95%可信區(qū)間(con

6、fidenceintervals，CI)計(jì)算血脂（TC、LDL膽固醇和HDL膽固醇）的凈差值(netchanges)。以預(yù)設(shè)的亞組分析及敏感性分析來尋找異質(zhì)性來源，并探討綠茶及其提取物對血清TC、LDL膽固醇或HDL膽固醇作用效應(yīng)的影響因素。
　　 研究結(jié)果：
　　 最終14個(gè)綠茶或綠茶提取物臨床干預(yù)試驗(yàn)被納入薈萃分析，研究對象共計(jì)1136人。薈萃分析顯示，與對照組相比，綠茶或其提取物干預(yù)組血清TC水平下降7.20mg/

7、dL(95%CI，-8.19～-6.21，P＜0.001)，LDL膽固醇水平下降2.19mg/dL(95%CI，-3.16～-1.21，P＜0.001)，均具有顯著性差異。血清HDL膽固醇水平升高0.25mg/dL（95%CI，-0.73～1.23，P=0.62），但變化未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。亞組分析和敏感性分析亦進(jìn)一步確證了此結(jié)果，并提示攝取綠茶或其提取物對血清TC，LDL膽固醇，HDL膽固醇的調(diào)節(jié)改善作用不受干預(yù)方式、茶多酚的劑量、干預(yù)時(shí)

8、間的長短、受試者的健康狀況以及納入RCT的研究質(zhì)量的影響。異質(zhì)性檢驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)這些研究的效應(yīng)值之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的異質(zhì)性(TC異質(zhì)性卡方值(heterogeneitychi-square)=14.30，I2=9.1%，P=0.353;LDL膽固醇異質(zhì)性卡方值=13.41，I2=25.4%，P=0.201;HDL膽固醇異質(zhì)性卡方值=13.36，I2=17.7%，P=0.270）。
　　 結(jié)論：
　　 薈萃分析結(jié)果提示，飲用綠茶

9、或口服綠茶提取物能夠顯著地降低血清TC，LDL膽固醇水平，并有提高血清HDL膽固醇水平的趨勢。亞組薈萃分析結(jié)果進(jìn)一步確證，綠茶及其提取物改善膽固醇代謝不受干預(yù)方式、茶多酚的劑量、干預(yù)時(shí)程、受試者的健康狀況以及納入RCT質(zhì)量的影響。排除了低質(zhì)量干預(yù)試驗(yàn)及商業(yè)性支持的敏感性分析結(jié)果顯示，綠茶或其提取物的攝入對血清TC、LDL和HDL膽固醇的作用效應(yīng)沒有發(fā)生改變，進(jìn)一步證實(shí)了此薈萃分析結(jié)果的穩(wěn)定性。
　　 第二部分，溶酶體酸脂酶基因變

10、異與冠心病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究
　　 研究背景：
　　 動(dòng)脈粥樣硬化所致的冠心病仍然是嚴(yán)重威脅人類生命健康的重要疾病。在我國，最新的流行病學(xué)調(diào)查顯示每年有超過100萬人死于冠心病。引起冠心病的原因眾多，傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素有高齡、肥胖、吸煙、高血壓、糖尿病、高血脂等，但傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素只能解釋50%左右的原因。冠心病作為一種復(fù)雜的異質(zhì)性疾病，受基因和環(huán)境的共同作用，具有明顯的家族性發(fā)病特點(diǎn)，屬多基因遺傳病，遺傳度超過50%。因此，尋找冠

11、心病的致病基因，從分子水平揭示其發(fā)病機(jī)制，可為及早發(fā)現(xiàn)冠心病的危險(xiǎn)人群并加強(qiáng)開展防治工作提供重要的基礎(chǔ)理論依據(jù)。
　　 有關(guān)膽固醇酯沉積病(thecholesterylestersstoragedisease，CESD)和沃爾曼病(Walmandisease，WD)的研究使人們認(rèn)識(shí)到溶酶體酸脂酶在脂質(zhì)代謝中的作用。這兩種常染色體隱性遺傳脂質(zhì)代謝障礙性疾病都是由于LIPA基因突變，導(dǎo)致其編碼的溶酶體酸脂酶嚴(yán)重缺陷，酶活性降低或消失

12、，膽固醇酯和甘油三酯沉積于肝、脾、淋巴結(jié)和其他組織的溶酶體內(nèi)，患者主要特征為高膽固醇血癥、血漿LDL膽固醇水平升高、青年動(dòng)脈粥樣硬化和早發(fā)性冠心病。溶酶體酸脂酶(LAL)是一種被限制在細(xì)胞溶酶體內(nèi)發(fā)揮消化作用的酸性水解酶。在PH值約等于5的酸性環(huán)境下，溶酶體酸脂酶可促進(jìn)甘油三酯、低密度脂蛋白(LDL)膽固醇和膽固醇酯水解成游離膽固醇和脂肪酸。最新的研究發(fā)現(xiàn)，在致動(dòng)脈粥樣硬化的泡沫細(xì)胞形成過程中，溶酶體酸脂酶的水解作用參與了動(dòng)員細(xì)胞質(zhì)脂滴

13、中膽固醇的逆行轉(zhuǎn)運(yùn)。即泡沫細(xì)胞內(nèi)的脂滴可以通過自吞噬作用進(jìn)入溶酶體，在溶酶體酸性脂酶促進(jìn)下，脂滴內(nèi)的膽固醇酯、LDL膽固醇及甘油三酯被水解為游離膽固醇和脂肪酸，重新被機(jī)體利用。Wild等人在歐洲人群中通過GWAS發(fā)現(xiàn)，LIPA是一個(gè)新的冠心病易感基因，但是在亞洲人中該基因變異性與冠心病易感性的關(guān)系尚不清楚。基于以上研究結(jié)果，我們提出假設(shè)，在中國漢族人群中，LIPA基因變異也可能與冠心病的遺傳易感性相關(guān)。
　　 研究目的：

14、　　 本研究擬在中國人群中驗(yàn)證溶酶體酸脂酶基因變異性與冠心病遺傳易感性。
　　 研究方法：
　　 本研究的病例一對照均來自北京阜外心血管病醫(yī)院，在經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診的568個(gè)冠心病病例和430個(gè)正常對照的人群中，采用PCR-LDR法對rs1412444進(jìn)行基因分型。按照顯性模式、隱性模式和加性模式進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，探討rs1412444變異與冠心病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。
　　 研究結(jié)果：
　　 本研究發(fā)現(xiàn)rs1412

15、444基因型變異與冠心病的易感性密切相關(guān)。在未校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素前，在顯性模式下(GGvs.GA+AA)，優(yōu)勢比[OR]=1.36，95%可信限[CI]1.05-1.75，P=0.018;在隱性模式下(GG+GA)vs.AA，優(yōu)勢比[OR]=1.94，95%可信限[CI]1.27-2.95，P=0.002；在加性模式下（GGvs.GAvs.AA），優(yōu)勢比[OR]=1.37，95%可信限[CI]1.13-1.66，P=0.001）。用Log

16、istic回歸模型校正了年齡、性別、體重指數(shù)、血壓、吸煙史、糖尿病史、血總膽固醇、LDL膽固醇、HDL膽固醇和甘油三酯水平等傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后，LIPA-rs1412444A等位基因攜帶者與野生型G等位基因攜帶者相比，仍顯示冠心病易感性增加（顯性模式：優(yōu)勢比[OR]=1.37，95%可信限[CI]1.01-1.88，P=0.046;加性模式：優(yōu)勢比[OR]=1.30，95%可信限[CI]1.02-1.65，P=0.032)。與攜帶G基因型相