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1、復(fù)旦大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文趨化因子CXCLl4在乳腺癌中的作用及其意義院系專業(yè)Y‘m研究生學(xué)位予衛(wèi)L導(dǎo)師弋r歲oP導(dǎo)師組成員腫瘤醫(yī)院腫瘤學(xué)顧筱莉碩士歐周羅教授邵志敏教授本課題受國家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目號(hào):30570695及81172506)資助復(fù)旦大學(xué)碩上論文中文摘要目的:了解趨化因子CXCLl4在人乳腺癌中的組成性、誘導(dǎo)性表達(dá)及其在乳腺癌細(xì)胞增殖及侵襲等方面發(fā)揮的作用,以及導(dǎo)致上述乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為變化的可能機(jī)制。通過動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探索
2、趨化因子CXCLl4對(duì)乳腺癌細(xì)胞成瘤性和轉(zhuǎn)移性的影響及其作用機(jī)制,以乳腺癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本為對(duì)象分析趨化因子CXCLl4表達(dá)與乳腺癌臨床特征相關(guān)性。方法:采用RT—PCR及Westernblot檢測(cè)2種正常乳腺上皮細(xì)胞系(HBL一100、MCF—IOA)及6種人乳腺癌細(xì)胞系(MCF一7、MDA—MB一231、MDAMB一231HM、ZR一75—30、SK—BR一3、BT474))中CXCLl4的基因表達(dá)和蛋白質(zhì)水平,通過穩(wěn)定轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)M
3、DAMB231HM細(xì)胞系過表達(dá)CXCLl4,采用CCK一8法及Transwell法分析轉(zhuǎn)染前后及空載體組細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞侵襲性的改變。取SCID小鼠15只,在乳腺脂肪墊(mfp)分別注射MDA—MB一231HM—CXCLl4、MDA—MB一231HM—vector和MDAMB231HM細(xì)胞,觀察移植瘤大小、體積、肺轉(zhuǎn)移數(shù)目及CD34表達(dá)情況。免疫組化法檢測(cè)208例乳腺癌患者癌組織中CXCLl4表達(dá),并結(jié)合臨床資料分析CXCLl4的表
4、達(dá)與乳腺癌預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果:RT—PCR及Westernblot結(jié)果均顯示CXCLl4在乳腺癌細(xì)胞系中呈現(xiàn)低表達(dá),其中,MDAMB231HM細(xì)胞系中表達(dá)量最低,通過構(gòu)建質(zhì)粒轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)MDA—MB一231HM過表達(dá)CXCLl4,建立MDA—MB一231HM—CXCLl4細(xì)胞系,MDAMB231HMCXCLl4細(xì)胞系與MDAMB231HM細(xì)胞系在細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲方面的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性意義(pO01)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,MDAMB一2
5、31HM—CXCLl4移植瘤的腫瘤大小、體積及肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目與MDA—MB一231HM移植瘤的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性意義(pO01),同時(shí)可見MDA—MB一231HMCXCLl4移植瘤內(nèi)微血管密度降低。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,CXCLl4在208例乳腺癌患者中陽性表達(dá)率為2548%,其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān),而與臨床預(yù)后呈正相關(guān)。結(jié)論:體外、體內(nèi)及臨床標(biāo)本研究的結(jié)果均表明,趨化因子CXCLl4可抑制乳腺癌細(xì)胞的生長及轉(zhuǎn)移,對(duì)患者具有保護(hù)
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