銀杏、火炬樹活性成分及其抗螨性研究.pdf

1、銀杏(Ginkgo biloba L.)是起源于二疊紀(jì)時(shí)期的蕨類植物,繁茂于侏羅紀(jì)時(shí)期,第三紀(jì)和第四紀(jì)地球的巨變和隨后的冰川摧毀了世界上銀杏樹,憑借我國(guó)優(yōu)越的地理位置和氣候條件得以幸免,因此素有“植物活化石”、“植物界熊貓”之美譽(yù)。 銀杏是聞名遐邇的藥用植物,特別對(duì)預(yù)防和治療心腦血管疾病、老年性癡呆等具有顯著療效,并相繼開發(fā)出藥品、保健品、化妝品、飲品等,同時(shí)銀杏還具有抗蟲特性。鑒于植物源殺蟲劑對(duì)環(huán)境友好、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn),

2、對(duì)銀杏抗蟲性研究逐漸成為熱點(diǎn),但目前研究的靶標(biāo)害蟲比較少,尤其缺乏對(duì)農(nóng)業(yè)危害較為嚴(yán)重的害螨的研究,另外,國(guó)內(nèi)外對(duì)銀杏的抗蟲活性成分也沒有一致的觀點(diǎn)。 本文旨在明確銀杏和火炬樹對(duì)二斑葉螨Tetranychus urticae Koch和山楂葉螨Tetranychus viennensis Zacher的抗性,進(jìn)而篩選抗螨性成分及提取工藝。分別采用培養(yǎng)皿法測(cè)定葉螨對(duì)銀杏葉的選擇性,以及在限制性條件下銀杏葉對(duì)兩種葉螨生存和產(chǎn)卵的影響；

3、利用固相微萃取(Solid phase microextraction,SPME)采集、GC-MS測(cè)定銀杏葉揮發(fā)性成分, "Y"型嗅覺儀測(cè)定它們對(duì)葉螨選擇行為的影響；分別利用8種銀杏單體成分、1種銀杏總酸測(cè)定它們對(duì)葉螨的拒食性和觸殺性；另外,比較了微波處理銀杏葉水浸液聯(lián)合乙醇和乙醚提取、溶劑提取與堿性溶液結(jié)合提取和乙醚萃取與大孔樹脂吸附三種工藝的提取物對(duì)山楂葉螨的毒力。結(jié)果證明： 1、銀杏葉對(duì)兩種葉螨的拒食率均為100％；在限制

4、性條件下葉螨在銀杏葉上的生存時(shí)間縮短、產(chǎn)卵被抑制。 2、初步鑒定出壬酸、十四酸、十五酸、十六酸、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮、二苯甲酮、丁羥甲苯、4,6-二特丁基-2-甲基苯酚、3-甲基-2-丁烯醇、5,7-二甲基-1,8-萘啶-2氨、1-甲基-9H-吡哆[3,4-b]吲哚-7-醇和1-苯-5-(1-蒎)-4-己烯-2-炔酮等12種銀杏葉揮發(fā)性成分。 3、在兩組氣味源中(銀杏葉-蘋果葉、銀杏葉-空氣),二斑葉螨和

5、山楂葉螨對(duì)銀杏葉的選擇率分別為22.2％、21.3％和23.5％、24.8％,與對(duì)照氣味源選擇率差異顯著；從銀杏活性成分中篩選出對(duì)二斑葉螨拒食率較高的異鼠李素、山奈素、銀杏內(nèi)酯C,A,B和十三烷基銀杏酸,對(duì)山楂葉螨拒食率較高的山奈素、異鼠李素、銀杏內(nèi)酯A,B、白果內(nèi)酯和銀杏總酸。銀杏內(nèi)酯A對(duì)山楂葉螨48 h的校正死亡率達(dá)74.06％,其次為十三烷基銀杏酸(52.36％),而其他所測(cè)成分均在25％以下。 4、銀杏葉粉經(jīng)乙醚萃取與D

6、M130大孔樹脂吸附后的流出液對(duì)山楂葉螨的校正死亡率達(dá)93.25％,其次為80％乙醇洗脫液(76.4％),而甲醇：乙酸乙酯(80:20 V/V)洗脫液和5％NaOH洗脫液的校正死亡率均在50％以下；銀杏葉粉經(jīng)冷水浸提、70％乙醇處理和乙醚富集后對(duì)山楂葉螨的校正死亡率達(dá)91.38％,而微波處理銀杏葉粉水浸液及有機(jī)溶劑與堿性溶液結(jié)合提取物對(duì)山楂葉螨的觸殺效果較差。 5、本文采用與銀杏近乎相同的方法研究了火炬樹葉對(duì)二斑葉螨和山楂葉螨的

7、抗性。結(jié)果證明：兩種葉螨對(duì)火炬葉的選擇率在10％以下；在限制性條件下葉螨在火炬樹葉上的生存時(shí)間明顯縮短,產(chǎn)卵被抑制。 6、初步鑒定出十八烯、α-法昵烯、1,12-十三二烯、4-庚醇、4-甲基-1-丙烯-3-醇、3,7,11-三甲基-2,6,10-二十二三烯-1-醇、苯甲酸乙酯、水楊酸甲酯、4,6-二特丁基-2-甲基苯酚、丁基化羥基甲苯和2-甲基-2-丁烯酸等11種火炬葉揮發(fā)性成分。 7、在兩組氣味源中(火炬葉-蘋果葉、火

8、炬葉-空氣),二斑葉螨和山楂葉螨對(duì)火炬葉的選擇率分別為9.3％、28.9％和5.6％、28％,與對(duì)照氣味源選擇率差異顯著；火炬葉粉經(jīng)95％乙醇回流提取、DM130樹脂柱吸附后的石油醚：乙酸乙酯(65:35 V/V)洗脫液對(duì)山楂葉螨24h的死亡率為100％,初步鑒定其毒性成分為弱極性酸性物質(zhì)和酚類化合物。 銀杏和火炬樹均系對(duì)二斑葉螨和山楂葉螨具有優(yōu)良抗性的非寄主植物,銀杏葉揮發(fā)物和非揮發(fā)性次生物質(zhì)均對(duì)葉螨的選擇行為造成影響,且拒食