銀杏酸的純化工藝及抗炎活性研究.pdf

1、本論文主要研究了銀杏酸提取液的純化工藝，選出較優(yōu)的純化方法。通過動物炎癥模型研究銀杏酸的抗炎活性，并在分子水平上研究了銀杏酸對變應性接觸性皮炎(Allergic contact dermatitis，ACD)抗炎作用機理。主要研究內容與結果如下:
　　1、銀杏酸純化方法的研究。通過水洗與硅膠層析結合的方法及NaOH萃取法對銀杏酸進行純化，利用HPLC法進行銀杏酸含量的檢測，得到水洗法結合硅膠層析法的最優(yōu)工藝:水洗法在料液比為1∶8

2、，溫度為60℃，水洗時間為5h，可將銀杏酸純度由33.9％提高到47.82％;硅膠層析法是將原濃度的銀杏酸以1mL/min的流速上樣，之后以1 mL/min的流速對其進行洗脫，可將水洗處理后的銀杏酸純度升高至67.5％。NaOH溶液萃取法可將銀杏酸醇提液的純度由33.9％提高至62.3％。
　　2、銀杏酸抗炎作用的研究。采用二甲苯致小鼠耳腫脹法、角叉菜膠致小鼠足腫脹法、小鼠皮膚毛細血管通透性試驗、小鼠變應性接觸性皮炎實驗來評價銀杏

3、酸的皮膚外用抗炎作用。結果表明:銀杏酸能抑制二甲苯所致的耳腫脹及角叉菜膠所致的足趾腫脹，銀杏酸高、低劑量組小鼠耳腫脹率和足趾腫脹率明顯低于模型對照組。銀杏酸還能顯著抑制二甲苯所致的小鼠腹部皮膚毛細血管通透性增高。在小鼠變應性接觸性皮炎(ACD)實驗中，銀杏酸皮膚外用組小鼠耳腫脹度和腫脹率降低，皮損情況得到改善，表明對小鼠變應性接觸性皮炎也有較好的治療效果。病理組織學觀察結果表明銀杏酸能降低二甲苯致耳腫脹的局部炎癥細胞浸潤、減輕皮損細胞水

4、腫，降低血管擴張程度;銀杏酸能降低角叉菜膠所致足腫脹組織的炎癥細胞浸潤;降低ACD小鼠耳廓組織炎癥細胞浸潤及細胞水腫。研究結果表明銀杏酸能抑制皮膚炎癥和變態(tài)反應，具有明顯的抗皮炎作用。
　　3銀杏酸對變應性接觸性皮炎(ACD)抗炎作用機理。在ACD發(fā)病過程中，Th1/Th2細胞及其之間的平衡發(fā)揮著重要的調節(jié)作用，本文研究了銀杏酸對調節(jié)Th1/Th2細胞平衡的相關基因表達的影響，包括Th1細胞分泌的主要細胞因子干擾素γ（IFN-γ）

5、及其轉錄因子T-bet，Th2細胞分泌的主要細胞因子白細胞介素4(IL-4)及其轉錄因子GATA-3，此外也研究了銀杏酸對細胞間黏附分子-1（ICAM-1）基因的影響。結果表明銀杏酸給藥組的干擾素γ(IFN-γ)、轉錄因子T-bet的基因表達量均低于模型組，而白細胞介素(IL-4)、轉錄因子GATA-3的基因表達量均高于模型組，說明銀杏酸能影響Th1和Th2細胞相關細胞因子及轉錄因子的表達，調節(jié)了Th1/Th2細胞之間的平衡，從而達到治